廣東婦女子宮內膜異位癥與腫瘤壞死因子及其基因多態(tài)性的相關性研究.pdf

1、子宮內膜異位癥(endometriosis，以下簡稱內異癥)是育齡婦女的一種多發(fā)病和常見病，主要引起痛經和不孕，容易復發(fā)，臨床上治療方法局限，復發(fā)率高。已有的研究表明內異癥可能是由多位點基因相互作用導致的一種遺傳性自身免疫性疾病，而這種遺傳自身免疫性疾病是離不開細胞因子對免疫反應的調節(jié)的。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β)就是這樣的細胞因子，它們在炎癥早期可誘導包括自身在內的多種細胞因子如白細胞介素-1(IL

2、-1)、白細胞介素-6(IL-6)等一些炎癥介質的產生，這些炎癥介質相互作用編制成網絡，共同調控，促使新生血管的生長、分化。同時過量的TNF表達可影響機體的免疫狀態(tài)。TNF基因是目前較為關注的與自身免疫性疾病相關的基因之一。近年來研究表明，TNF基因多態(tài)性與許多自身免疫性疾病，尤其是與HLA連鎖疾病中TNF水平高低密切相關。TNF基因存在多個位點的基因多態(tài)性，TNF-α啟動子區(qū)域-308位點和TNF-β基因1號內含子中+252位點存在G

3、/A單核苷酸替換多態(tài)性存在可能與血清及腹腔液中TNF-α和TNF-β表達量相關，而其他位點的多態(tài)性與TNF水平關系不明顯。因此本研究選擇TNF-α啟動子區(qū)域-308位點和TNF-β基因1號內含子中+252位點上的單核苷酸多態(tài)性作為研究指標。本研究旨在初步探討廣東婦女TNF基因多態(tài)性與內異癥發(fā)病之間的關系。 目的1、研究TNF-α、TNF-β在內異癥患者術前血清、術后血清、腹腔液及非內異癥婦女術前、術后血清及腹腔液中的表達量的變化

4、情況，探討TNF-α、TNF-β在內異癥發(fā)病中的作用及其作為內異癥術后療效的觀察及復發(fā)指標的可能。 2、研究內異癥患者及非內異癥婦女TNF-α基因啟動子區(qū)域-308位點和TNF-β基因1號內含子中+252位點的多態(tài)性，探討TNF基因多態(tài)性與內異癥的遺傳易感性的關系，力求在基因水平上探討內異癥發(fā)病的機制，以求找到治療內異癥的根本切入點。 方法1、采用酶聯免疫吸附試驗檢測82例內異癥患者術前血清、73例內異癥患者術后血清及4

5、2例內異癥患者腹水中的TNF-α、TNF-β表達。以68例非內異癥婦女的術前、術后血清及40例非內異癥婦女的腹水為對照。 2、應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性技術和等位基因特異性擴增技術(PCR-RFLP和ASA技術)檢測82例內異癥患者(內異癥組)80例非內異癥婦女(對照組)的TNF-α基因啟動子區(qū)域-308位點和TNF-β基因1號內含子中+252位點的多態(tài)性，并分析TNF基因多態(tài)性與內異癥風險之間的關系。兩組均為廣東地

6、區(qū)漢族婦女。 結果1、結果顯示內異癥組血清中TNF-α和TNF-β含量均顯著高于對照組(P＜0.01)，且二者表達量隨病情加重有上升趨勢。內異癥組患者腹腔液中TNF-α、TNF-β的濃度明顯高于對照組(P均＜0.001)。內異癥組患者腹腔液中TNF-α、TNF-β水平均明顯高于血清中的水平(P均＜0.01)。手術后患者血清中的TNF-α和TNF-β的含量隨著內異灶的清除而下降。特別是Ⅲ、Ⅳ期比Ⅰ、Ⅱ期下降得更明顯(P＜0.01)

7、。增生期與分泌期比較，兩組腹水中TNF-α、TNF-β的濃度的差異均無統(tǒng)計學意義。 2、結果發(fā)現TNF-β+252位點等位基因及基因型分布在內異癥組和對照組間差異顯著(x2=6.562，P＜0.05；x2=6.562，P＜0.05)，其中等位基因A使患內異癥的相對危險度提高了1.793倍。攜帶AA基因型的個體患內異癥的風險是GG基因型的3.33倍(x2=6.562，P＜0.05)。TNF-α-308位點等位基因和基因型頻率分布在

8、兩組間比較，差異無顯著性(x2=0.5429，x2=0.640P均＞0.05)。但TNF-α-308位點與TNF-β+252位點變異基因型之間有協同作用，TNF-α基因-308位點GA與TNF-β基因+252位點GG聯合基因型OR值為2.445，TNF-α基因-308位點GA和TNF-β基因+252位點AA聯合基因型OR值增高至10.99(P＜0.05)。內異癥組TNF-β基因+252位點AA基因型血清中TNF-β水平較GG基因型TNF

9、-β水平明顯升高(t=2.029P＜0.05)，而內異癥和對照組TNF-β基因+252位點其他基因型對血清中TNF-α和TNF-β的濃度的影響無統(tǒng)計學意義。內異癥和對照組TNF-α基因-308位點的各種基因型對血清中TNF-α和TNF-β的濃度的影響同樣無統(tǒng)計學意義。 結論1、TNF在內異癥發(fā)病中扮演著重要角色，其在血清和腹腔液中均隨病情的嚴重程度而上升，同時在一定程度上對術后隨訪、檢測手術效果的評價起到重要作用。 2、