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文檔簡介
1、目的:研究異鉤藤堿(Isorhynchophylline,Iso)對血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的心肌肥大的抑制作用,并探討其機制。
方法:采用初生大鼠的原代心肌細胞培養(yǎng),BCA法測總蛋白含量,測定細胞表面積和心房利鈉因子(atrial natriuretic factor,ANF)mRNA的表達來觀察Iso對血管緊張素Ⅱ引起心肌肥大的的抑制作用。化學法測定細胞培養(yǎng)上清液一氧化氮(nitricox
2、ide,NO)含量和一氧化氮合酶(nitric oxide synthetase,NOS)活性。Real timeRT-PCR檢測心肌細胞外信號調節(jié)激酶2(extracellular signal-regulated kinase2,ERK2),內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA的表達,Western blot法檢測絲裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白的表
3、達,探討Iso的可能作用機制。
結果:AngⅡ(10-6M)明顯可以促進心肌細胞的肥大,使心肌細胞的表面積明顯增加,蛋白含量增加,降低細胞上清液中一氧化碳(NO)含量及一氧化碳合酶(NOS)活性,增加CaN,ERK2 mRNA表達,并且提高MKP-1蛋白表達。降低eNOS mRNA表達。Iso可以預防由AngⅡ引起的心肌細胞肥大,增加細胞釋放NO和增加NOS活性,上調eNOS mRNA表達,下調CaN、ERK2 mRNA表
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