血管緊張素Ⅱ?qū)υ囵B(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞致炎作用的研究.pdf

1、背景與目的：腎素—血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)對心血管系統(tǒng)、細(xì)胞功能、水鹽平衡等有重要的調(diào)節(jié)作用。研究表明,在許多組織或器官,如腎臟、心臟和血管中存在著獨(dú)立的局部腎素—血管緊張素系統(tǒng)(local renin-angiotensinsystem,LRAS)。血管緊張素Ⅱ(angiotensionⅡ,AngⅡ)是腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的主要效應(yīng)因子,其生物學(xué)功能主要體現(xiàn)在調(diào)節(jié)血管張力和血

2、流、促進(jìn)細(xì)胞生長和增生作用。近年研究發(fā)現(xiàn)AngⅡ可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、化學(xué)趨化因子和粘附因子等多種炎性介質(zhì)的表達(dá)參與機(jī)體炎癥反應(yīng)相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展。纈沙坦(Valsartan)作為新型血管緊張素受體阻滯劑(angiotensin receptor antagonist,ARB)可以有效阻斷AngⅡ發(fā)揮作用。
　　本研究通過運(yùn)用不同濃度AngⅡ制劑及聯(lián)合運(yùn)用纈沙坦作用于人工培養(yǎng)的成年大鼠原代心肌細(xì)胞,檢測培養(yǎng)液中致炎性細(xì)胞因子:腫

3、瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白介素-6(interleukin-6,IL-6)濃度,觀察AngⅡ?qū)π募〖?xì)胞的致炎作用以及纈沙坦對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,為臨床運(yùn)用藥物防治由AngⅡ引發(fā)的心臟炎癥反應(yīng)提供新的思路和依據(jù)。材料與方法1、應(yīng)用分步消化法進(jìn)行Wistar大鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng),采用電鏡觀察形態(tài)學(xué)方法鑒定所培養(yǎng)的心肌細(xì)胞。2、將培養(yǎng)的心肌細(xì)胞隨機(jī)分為對照組和實驗組Ⅰ、Ⅱ。對照組僅進(jìn)行普通

4、培養(yǎng),不進(jìn)行藥物干預(yù)。實驗組Ⅰ采用不同濃度AngⅡ制劑作用于人工培養(yǎng)的原代大鼠心肌細(xì)胞。實驗組Ⅱ在實驗組Ⅰ的基礎(chǔ)上加入定量AngⅡ受體拮抗劑——纈沙坦。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附方法(ELISA)檢測各個標(biāo)本TNF-α、IL-6的濃度值。
　　實驗結(jié)果數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((?)±S)表示,采用統(tǒng)計分析軟件SPSS14.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。統(tǒng)計方法用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析,各項統(tǒng)計結(jié)果,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。3、運(yùn)用電鏡觀察各分組的細(xì)

5、胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)變化。
　　結(jié)果：1、對照組和實驗組Ⅰ、Ⅱ細(xì)胞培養(yǎng)液的TNF-α、IL-6濃度比較存在差異,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);2、實驗組Ⅰ細(xì)胞培養(yǎng)液的TNF-α、IL-6濃度明顯高于實驗組Ⅱ,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0);3、電鏡下觀察對照組細(xì)胞和實驗組Ⅰ細(xì)胞具有顯著形態(tài)學(xué)差異,對照組細(xì)胞和實驗組Ⅱ細(xì)胞具有形態(tài)學(xué)差異,同時實驗組Ⅰ、Ⅱ的細(xì)胞也存在形態(tài)學(xué)差異。
　　結(jié)論：1、通過檢測各組細(xì)胞培養(yǎng)液上清TNF-α、IL-