HMGB1-TLR4和NF-κB信號(hào)通路在子癇前期中的研究.pdf

1、目的:
　　1.探討高遷移率族蛋白(HMGB1)/TOLL受體4(TLR4)和NF-kB信號(hào)通路在子癇前期中的可能作用;
　　2.研究子癇前期患者血清和胎盤中HMGB1、TLR4及NF-kBp65的表達(dá)及其相關(guān)性,從而探討其與子癇前期的關(guān)系。
　　方法:選擇輕度子癇前期患者10例、重度子癇前期患者20例和同期正常妊娠組30例作為研究對(duì)象。
　　1.二步法免疫組織化學(xué)(SP法)檢測(cè)胎盤HMGB1、TLR4、NF-k

2、Bp65蛋白的表達(dá)變化及在組織中的定性、定位;
　　2.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)胎盤組織中HMGB1mRNA、TLR4mRNA、NF-kBp65mRNA的表達(dá)變化;
　　3.采用ELISA方法檢測(cè)血清中HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白濃度。
　　結(jié)果:
　　1.選取的病例在臨床特征比較中,子癇前期組與對(duì)照組在年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);重度子癇前期組比對(duì)照組孕婦終止妊娠時(shí)間早

3、(P0.05);子癇前期組平均動(dòng)脈壓(MAP)、收縮壓、舒張壓、新生兒體重與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.免疫組化結(jié)果顯示:
　　2.1正常妊娠組HMGB1主要表達(dá)于胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、少量間質(zhì)細(xì)胞的胞核,HMGB1在輕度子癇前期組及重度子癇前期組胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、少量間質(zhì)細(xì)胞的胞核及胞漿表達(dá);TL

4、R4、NF-kBp65蛋白均主要表達(dá)于胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、少量間質(zhì)細(xì)胞的胞漿及胞膜。
　　2.2子癇前期患者組胎盤HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白表達(dá)均較正常對(duì)照組明顯增強(qiáng),差異有顯著性(P<0.0125);重度子癇前期患者胎盤HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白與輕度子癇前期比較差異無條統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.0125)。
　　3.RT-PCR結(jié)果顯示:
　　3.1子癇前期患者胎盤組織中HMG

5、B1mRNA、TLR4mRNA、NF-kBp65mRNA表達(dá)均明顯強(qiáng)于正常組,差異有顯著性(P<0.05);重度子癇前期患者胎盤HMGB1、TLR4、NF-kBp65mRNA與輕度子癇前期比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。
　　3.2HMGB1mRNA與TLR4mRNA的表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.567,P<0.01);HMGB1mRNA與NF-kBp65mRNA的表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.683,P<0.

6、01);TLR4mRNA與NF-kBp65mRNA的表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.729,P<0.01)。
　　4.ELISA測(cè)定結(jié)果顯示:
　　4.1子癇前期患者血清中HMGB1、TLR4、NF-kBp65的含量較正常組明顯升高,差異有顯著性(P<0.01);且重度子癇前期患者血清中HMGB1、TLR4、NF-kBp65蛋白表達(dá)高于輕度子癇前期(P　　4.2血清NF-kBp65與TLR4的表達(dá)強(qiáng)

7、度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.549,P<0.01);血清HMGB1與TLR4的表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.668,P<0.01);HMGB1與NF-kBp65的表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)(r=0.655,P<0.01)。
　　結(jié)論:當(dāng)TLR4識(shí)別了作為炎癥因子和內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式配體HMGB1時(shí),其下游信號(hào)通路開啟,MyD88聚集,活化NF-kB并轉(zhuǎn)錄入核,釋放大量炎性因子造成胎盤血管損傷,促進(jìn)子癇前期的發(fā)生、發(fā)展,