長(zhǎng)沙地區(qū)急性下呼吸道感染住院兒童病毒譜調(diào)查及人偏肺病毒的現(xiàn)狀分析.pdf

1、第一部分2007-2008年長(zhǎng)沙地區(qū)急性下呼吸道感染住院兒童病毒譜調(diào)查
　　目的:
　　了解2007-2008年長(zhǎng)沙地區(qū)急性下呼吸道感染(acute low respiratory tract infection,ALRTI)住院兒童常見呼吸道病毒的流行特點(diǎn),為本地區(qū)兒童ALRTI的防治提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和科學(xué)根據(jù)。
　　對(duì)象及方法:
　　1、收集2007年9月-2008年8月在湖南省人民醫(yī)院兒科醫(yī)學(xué)中心診斷為ALRT

2、I的住院患兒鼻咽抽吸物(Nasopharyngeal aspirates,NPAs)標(biāo)本。
　　2、采用RT-PCR方法檢測(cè)呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒(IFVA、B型)、副流感病毒(PIV1-3型)、人偏肺病毒(hMPV)、冠狀病毒-NL63(HCoV-NL63)、冠狀病毒-HKU1(HCoV-HKU1);采用 PCR方法檢測(cè)腺病毒(ADV)、博卡病毒(HBoV);采用巢式 PCR方法檢測(cè)多瘤病毒 WU(

3、WUPyV)和多瘤病毒KI(KIPyV),并對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行基因測(cè)序以證實(shí)。
　　3、對(duì)各種病毒在兒童ALRTI中的流行病學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　1、2007年9月-2008年8月共收集NPAs標(biāo)本1165份,有871份檢出了病毒,總檢出率74.76％(871/1165),其中 RSV最為常見,檢出率為27.03%(315/1165);其次為 HRV,檢出率17.33%(202/1165);PIV3檢出率13.

4、73%(160/1165);HBoV檢出率為8.66%(101/1165);hMPV檢出率為6.52%(76/1165);KIPyV檢出率為5.92%(69/1165);ADV檢出率為4.46%(52/1165);IFVB檢出率3.60%(42/1165);WUPyV檢出率為3.51%(41/1165);IFVA檢出率1.97%(23/1165);HCoV-HKU1、 HCoV-NL63、PIV1及PIV2分別檢出12份、3份、2份及7

5、份,檢出率分別為1.03%,0.25%,0.17%及0.60%。
　　2、763例男性患者中病毒陽(yáng)性檢出581例(76.14%),女性402例中陽(yáng)性檢出290例(72.13%),男女之間病毒陽(yáng)性檢出率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=2.241, P=0.134);但PIV3,hMPV和HBoV的陽(yáng)性檢出率男多于女,其它無(wú)差異。
　　3、采集標(biāo)本的患兒年齡從出生后1天至<14歲,平均年齡15.45±17.85個(gè)月。1歲以下患兒病毒陽(yáng)性

6、檢出率為75.37%(505/670);1~3歲患兒病毒陽(yáng)性檢出率為75.57%(263/348);3~5歲檢出率為72.38%(76/105);≥5歲檢出率為64.28%(27/42),陽(yáng)性檢出率在各年齡段之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=10.934,P=0.027),尤以6月~年齡段檢出最高,且不同病毒有各自年齡段分布特點(diǎn)。
　　4、在研究期間內(nèi),病毒總的檢出率在四季分布有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=12.307, P=0.006),以冬季檢出

7、率最高,不同病毒的四季分布高峰有不同。
　　結(jié)論:
　　1、本研究期間內(nèi),ALRTI住院兒童病毒陽(yáng)性檢出率高達(dá)74.76%,表明病毒病原在長(zhǎng)沙地區(qū)兒童ALRTI中占有重要地位。
　　2、本研究首次報(bào)道了2007-2008年長(zhǎng)沙地區(qū)ALRTI住院兒童病毒譜的構(gòu)成其中RSV、HRV、PIV3占主要地位,近年新發(fā)現(xiàn)的HBoV和hMPV也有較高比例。
　　3、病毒檢出率在各年齡段之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,尤以6月~年齡段檢出最高

8、,且不同病毒有各自年齡段分布特點(diǎn);病毒總檢出率在男女之間無(wú)差異,而不同病毒有各自特點(diǎn);冬季病毒總檢出率最高,不同病毒的四季分布高峰有不同。
　　第二部分2007-2008年人偏肺病毒在長(zhǎng)沙地區(qū)急性下呼吸道感染住院兒童中的現(xiàn)狀分析
　　目的:
　　了解2007-2008年長(zhǎng)沙地區(qū)ALRTI住院兒童人類偏肺病毒(hMPV)感染的流行病學(xué)、臨床特點(diǎn)及基因分型等情況,比較PCR擴(kuò)增產(chǎn)物序列與GenBank中相應(yīng)序列的差異,探討

9、不同基因型臨床表現(xiàn)之間的差異,為進(jìn)一步的防治 hMPV的研究奠定基礎(chǔ)。
　　對(duì)象及方法:
　　1、收集2007年9月-2008年8月在湖南省人民醫(yī)院兒科醫(yī)學(xué)中心診斷為ALRTI的住院兒童NPAs標(biāo)本。
　　2、采用RT-PCR方法檢測(cè)hMPV M基因及F基因,并對(duì)陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行連接、轉(zhuǎn)化、克隆后測(cè)序。
　　3、利用生物軟件Dnastar將所測(cè)得的序列與GenBank中的hMPV參考株進(jìn)行同源性比對(duì)及核苷酸、氨基

10、酸序列變異分析,利用Mega軟件完成進(jìn)化分析并繪制基因進(jìn)化樹,并進(jìn)行基因分型。
　　4、對(duì)hMPV在ALRTI住院兒童中的流行病學(xué)和臨床特點(diǎn)進(jìn)行分析。
　　5、探討不同基因型臨床表現(xiàn)之間的差異。
　　結(jié)果:
　　1、本研究1165例NPAs標(biāo)本中檢測(cè)到76例hMPV陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物,檢出率為6.52%。
　　2、將陽(yáng)性PCR產(chǎn)物進(jìn)行序列測(cè)定及分析,發(fā)現(xiàn)其與GeneBank中已知標(biāo)準(zhǔn)株序列的同源在97-100%之

11、間,有個(gè)別堿基的插入和突變,提示hMPV長(zhǎng)沙株的核苷酸變異較小。hMPV亞基因型A2與B2的核苷酸序列及推導(dǎo)的氨基酸序列同源性分別為86.06%-87.15%和81.14%-82.46%。hMPV A2亞基因型的不同長(zhǎng)沙株之間核苷酸序列及推導(dǎo)的氨基酸序列同源性分別為98.91%-99.56%和98.58%-99.13%,而B2亞基因型之間分別為95.91%-97.98%及96.37%-97.38%。進(jìn)化分析顯示76例hMPV長(zhǎng)沙株可分為

12、A、B兩個(gè)基因型,A型占94.73%(72/76),全部為亞基因型A2,B型占5.26%(4/76),全部為亞基因型B2,未發(fā)現(xiàn)亞基因型A1、B1。
　　3、陽(yáng)性檢出患兒年齡從20天到12歲,平均年齡15.87個(gè)月。其中男性59例,女性17例,男女之比為3.47:1,男性較女性檢出率高(χ2=5.300 P<0.05),1歲以下患兒占63.15%,陽(yáng)性檢出率在春季(3、4、5月份)出現(xiàn)高峰,其中3、4月份最高,8、9、10月份未見

13、檢出。
　　4、在hMPV陽(yáng)性標(biāo)本中同時(shí)還檢出其它多種病毒陽(yáng)性,混合感染高達(dá)57.89%,其中HBoV最多,其次是RSV;比較單一hMPV與混合其它病毒陽(yáng)性檢出病例的年齡、性別、發(fā)熱、熱程、喘息、嘔吐、腹瀉、有無(wú)基礎(chǔ)疾病、住院天數(shù)等二者間均無(wú)差異。
　　5、陽(yáng)性檢出病例的臨床癥狀、體征和胸片表現(xiàn)與其它病毒感染相似,臨床診斷包括支氣管肺炎、毛細(xì)支氣管炎、急性支氣管炎、支氣管哮喘合并肺部感染,其中支氣管肺炎最多見。
　　6

14、、比較A、B兩種基因型陽(yáng)性檢出病例的年齡、性別、發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、喘息、濕啰音、有無(wú)基礎(chǔ)疾病、住院天數(shù)等二者間均無(wú)差異。
　　結(jié)論:
　　1、hMPV是長(zhǎng)沙地區(qū)住院兒童ALRTI的重要病毒病原。
　　2、2007-2008年hMPV長(zhǎng)沙株核苷酸變異較小,有A2、B2兩種不同基因型在長(zhǎng)沙地區(qū)流行,以A2基因型為主。
　　3、hMPV陽(yáng)性檢出患兒年齡主要集中在1歲以下;男多于女;在春季的3、4月為檢出率高峰;臨床表現(xiàn)