玫煙色棒束孢致病相關(guān)基因的差異表達(dá)研究.pdf

1、玫煙色棒束孢（Isaria fumosorosea）是國(guó)內(nèi)外生物防治中應(yīng)用廣泛的昆蟲(chóng)病原真菌之一，在小菜蛾的防治中發(fā)揮著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)室篩選到一株對(duì)小菜蛾具有高致病力的玫煙色棒束孢菌株 IFCF01。為了能夠更深入了解玫煙色棒束孢對(duì)小菜蛾的致病機(jī)理、充分發(fā)揮該菌株的應(yīng)用潛力，本研究采用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)玫煙色棒束孢侵染小菜蛾過(guò)程中的8個(gè)潛在致病基因的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)，推斷不同基因在侵染過(guò)程中的作用。主要結(jié)果分述如下：
　　

2、在玫煙色棒束孢侵染致病小菜蛾的前期，與致病相關(guān)的基因?yàn)椋旱谌悗锥≠|(zhì)酶基因（ChiAⅢ）、L-絲氨酸脫水酶基因（L-Ser）、類脂滴蛋白酶基因（MPL-1）。結(jié)果表明：（1）ChiAⅢ基因在菌侵染小菜蛾后的第12 h、30 h、36 h的基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照中的表達(dá)量，在菌侵染小菜蛾后的第5 d、10 d基因的表達(dá)量顯著的低于對(duì)照。（2）L-Ser基因在菌侵染小菜蛾后的第12 h的基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照和其他時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量。（3）MP

3、L-1基因在菌侵染小菜蛾后的第12 h的基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照和其他時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量，除侵染后第12 h外，該基因在其他的處理時(shí)間點(diǎn)均呈現(xiàn)下調(diào)表達(dá)。
　　在玫煙色棒束孢侵染致病小菜蛾的后期，與致病相關(guān)的基因有：cAMP依賴性蛋白激酶調(diào)節(jié)亞基基因（PK）、類馬鈴薯糖蛋白磷脂酶基因（PLP）、腺苷酸環(huán)化酶基因（ADC）、MAP激酶激活因子基因（MAPKK）、Mmc蛋白基因（Mmc）。結(jié)果表明：（1）Mmc基因在菌侵染小菜蛾的過(guò)程中，除侵

4、染后第15 d，其余的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的基因表達(dá)量與對(duì)照相比均呈現(xiàn)為上調(diào)表達(dá)，其中，第24 h、30 h、36 h、10 d的表達(dá)量顯著高于對(duì)照和其他時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量。（2）ADC基因在菌侵染小菜蛾后第12 h、24 h、30 h和36 h該基因呈現(xiàn)出下調(diào)表達(dá)，表達(dá)量均低于對(duì)照；該基因在菌侵染小菜蛾后第5 d、10 d、15 d呈現(xiàn)出上調(diào)表達(dá)，且基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照。（3）PLP基因在玫煙色棒束孢侵染小菜蛾后首先呈現(xiàn)出與對(duì)照表達(dá)量相似的穩(wěn)定表

5、達(dá)，直到侵染后第10 d和第15 d開(kāi)始呈現(xiàn)出上調(diào)表達(dá)，該基因表達(dá)量在以上兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于對(duì)照。（4）PK基因在玫煙色棒束孢侵染小菜蛾后第12 h、24 h、30 h和36 h呈現(xiàn)出下調(diào)表達(dá)，表達(dá)量均低于對(duì)照；在菌侵染小菜蛾后第5 d、10 d、15 d該基因呈現(xiàn)出上調(diào)表達(dá)且基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照。（5）MAPKK基因在玫煙色棒束孢侵染小菜蛾的過(guò)程中始終是下調(diào)表達(dá)的，其中，除菌侵染小菜蛾后第15 d以外，其余時(shí)間點(diǎn)的基因表達(dá)量均顯

6、著低于對(duì)照。
　　綜上所述，本研究所選的8個(gè)玫煙色棒束孢潛在致病相關(guān)基因在真菌侵染致病小菜蛾過(guò)程中，除MAPKK基因表達(dá)量在整個(gè)侵染過(guò)程中的各個(gè)階段相對(duì)于對(duì)照均下調(diào)表達(dá)外，其余7個(gè)基因的表達(dá)量均在真菌侵染致病的不同階段有著顯著的上調(diào)表達(dá)。其中，ChiAⅢ基因、L-Ser基因和MPL-1基因的表達(dá)量均在真菌侵染小菜蛾后第12 h顯著高于對(duì)照，表明這三個(gè)基因參與并作用于玫煙色棒束孢對(duì)小菜蛾侵染致病前期的體壁入侵階段；PK基因、PLP基