CXCR7及其配體CXCL12對人卵巢癌HO8910細胞增殖、粘附和侵襲能力的影響.pdf

1、卵巢癌在所有女性常見惡性腫瘤中致死率最高，其早期癥狀極不明顯且極易擴散轉移，因此，探究卵巢癌細胞的增殖、轉移等行為的分子機制對于改善卵巢癌的診治和預后，提高患者生存率有著非常重大的意義。人類多種腫瘤細胞中都有趨化因子12（CXC chemokine ligand-12,CXCL12）及其受體CXCR7和CXCR4的表達，CXCR7/CXCL12生物調控軸在包括腫瘤惡性增殖、侵襲轉移、腫瘤血管生成等腫瘤發(fā)展過程中也有著不可輕視的調控作用。

2、有研究顯示卵巢癌細胞HO8910表達CXCR7而且多種細胞活動受其調控，所以本研究以HO8910細胞為對象，設計CXCR7基因沉默體系下調CXCR7表達，使用CXCR4的拮抗劑AMD3100來阻斷CXCR4的正常功能，觀察檢測CXCR7/CXCL12生物調控軸對HO8910細胞擴增、粘附及侵襲轉移等能力的影響，并試圖闡明此生物調控軸在卵巢癌惡性增殖擴散等過程的中的調控機制，從而為卵巢癌的診斷、治療和預后提供新的靶點與思路。
　　研

3、究方法及結果：
　　1、根據(jù)人類CXCR7基因信息設計合成了27mersiRNA來下調CXCR7基因的表達水平，優(yōu)化轉染體系并驗證此體系的沉默效率。使用免疫印跡法（Western blotting）和實時熒光定量技術分別檢測CXCR7基因沉默前后卵巢癌細胞HO8910中CXCR7、CXCR4的蛋白和CXCR7 mRNA表達水平。確認在HO8910細胞中表達CXCR4和CXCR7，且在使用siRNA沉默HO8910細胞中的CXCR7

4、基因后，CXCR7 mRNA和蛋白表達水平均顯著降低。
　　2、使用CXCR7基因沉默體系下調HO8910細胞中CXCR7的表達，使用CXCR4的小分子拮抗劑AMD3100阻斷CXCR4的正常功能。然后使用CCK-8法檢測對CXCL12參與調控的HO8910細胞增殖能力的影響；通過結晶紫染色法檢測對CXCL12參與調控的HO8910細胞粘附能力的影響；在Transwell小室腫瘤侵襲模型中來進行體外侵襲能力檢測，以此檢測CXCL1

5、2誘導調控的HO8910細胞的侵襲能力的變化。
　　實驗結果顯示：CXCL12能夠顯著地提高HO8910細胞增殖、粘附、侵襲能力。下調CXCR7基因表達或者阻斷CXCR4蛋白功能均可導致由CXCL12誘導調控的HO8910細胞體外粘附能力、細胞增殖能力以及侵襲能力的顯著下降。而且當單獨下調CXCR7基因表達時對HO8910細胞體外粘附能力、細胞增殖能力的抑制效果更加明顯，單獨阻斷CXCR4蛋白正常功能時對HO8910細胞侵襲能力的