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文檔簡介
1、目的:探討在炎癥因子與凋亡細胞刺激下對機體抗原遞呈細胞白細胞介素27(Interleukin-27,IL-27)表達的調控。以及機體抗原遞呈細胞吞噬凋亡細胞后對白細胞介素27表達的調控。
方法:采用熒光素酶報告基因瞬時轉染鼠巨噬細胞系RAW264.7(RAW細胞)細胞,用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)、干擾素γ(IFN-γ)和X射線誘導凋亡細胞對細胞刺激,比較各組細胞中p28亞基啟動子熒光素酶活性;用同
2、樣條件對RAW細胞、小鼠腹腔巨噬細胞、小鼠小膠質細胞和骨髓源樹突狀細胞刺激,采用實時定量PCR法,檢測不同刺激組細胞中IL-27 p28亞基基因mRNA的轉錄表達水平。使用Western Blot法檢測不同刺激組細胞內(nèi)IL-27總蛋白表達水平。用ELISAs探測小膠質細胞在不同條件刺激下培養(yǎng)液內(nèi)IL-27蛋白的表達量。
結果:LPS刺激和LPS與IFNγ共刺激的小膠質細胞和樹突狀細胞IL-27 p28基因mRNA表達與空白對照
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