中國對蝦雄性生殖系統(tǒng)感染W(wǎng)SSV及其在垂直傳播中的作用.pdf

1、白斑綜合癥(WhiteSpotSyndrome，WSS)是養(yǎng)殖對蝦危害最大的病害之一，自1992年在中國臺(tái)灣地區(qū)發(fā)生以來，迅速波及全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)，造成了難以估量的經(jīng)濟(jì)損失。為此，各國學(xué)者對其進(jìn)行深入的研究，試圖從傳播途徑著手，控制其流行。 本研究通過對中國對蝦(Fenneropenaeuschinensis)雄性生殖系統(tǒng)感染白斑綜合癥病毒(WhiteSpotSyndromeVirus，WSSV)的實(shí)驗(yàn)觀察，研究感染W(wǎng)SSV的對蝦

2、精莢在病毒從親代至子代垂直傳播中的作用；對中國對蝦越冬親蝦在不同溫度條件下進(jìn)行感染W(wǎng)SSV的實(shí)驗(yàn)，采用活體取樣的方式監(jiān)控對蝦感染W(wǎng)SSV情況，研究不同水溫條件下WSSV感染中國對蝦越冬親蝦的能力及致病性。為探討WSSV垂直傳播途徑提供證據(jù)，為中國對蝦無特定病原(Specificpathogenfree，SPF)苗種培育及WSSV的防治積累科學(xué)資料。 本研究分為三個(gè)部分。第一，對性腺發(fā)育成熟的中國對蝦雄蝦(♂)進(jìn)行人工感染實(shí)驗(yàn)，采

3、用巢式PCR技術(shù)，檢測感染后的中國對蝦雄性生殖系統(tǒng)受WSSV感染情況，同時(shí)選取感染嚴(yán)重的蝦樣進(jìn)行電鏡觀察。檢測結(jié)果表明，精巢、輸精管和精莢均可被WSSV感染，但性腺各部分受WSSV感染的程度有所不同，其中精莢受感染的最多，輸精管次之，精巢最少。電鏡觀察結(jié)果顯示，WSSV粒子只存在于精巢、輸精管和精莢的結(jié)締組織中，而在其他組織和各期生殖細(xì)胞中均未發(fā)現(xiàn)病毒粒子。巢式PCR檢測和電鏡觀察結(jié)果均表明：WSSV粒子感染了中國對蝦的雄性生殖系統(tǒng)，且

4、對性腺感染存在著一定的組織特異性。 第二，對中國對蝦雄蝦進(jìn)行WSSV投喂感染實(shí)驗(yàn)，在確定其攜帶WSSV粒子后，將被WSSV感染的精莢人工移植到健康雌蝦的納精囊中，在無其它病原感染的情況下，促其產(chǎn)卵繁殖。統(tǒng)計(jì)各組子代的受精率、孵化率及無節(jié)幼體至潘狀幼體的變態(tài)率，利用巢式PCR技術(shù)對親蝦及子代進(jìn)行WSSV檢測。結(jié)果表明，由于病毒感染精莢的植入而導(dǎo)致雌蝦納精囊也被病毒感染，且其受精卵、無節(jié)幼體和溞狀幼體也不同程度的被病毒感染。對各組子

5、代的跟蹤研究發(fā)現(xiàn)，卵子受精率并沒有受到病毒感染的影響，精卵細(xì)胞可以正常結(jié)合；而受精卵的孵化率及其無節(jié)幼體的變態(tài)率則均受到WSSV感染的影響。其中WSSV對受精卵的孵化率影響顯著(P=0.045＜0.05)，感染組的平均孵化率(32.84％)比對照組(63.85％)要低的多。 第三，對中國對蝦越冬親蝦在不同溫度條件下進(jìn)行感染W(wǎng)SSV的實(shí)驗(yàn)研究，采用活體取樣的方式監(jiān)控對蝦感染W(wǎng)SSV情況，研究不同水溫條件下WSSV感染中國對蝦越冬親

6、蝦的能力及致病性。結(jié)果顯示，高溫組(18～21℃)和低溫組(9～12℃)對蝦累積死亡率有顯著差異(P=0.041＜0.05)，中溫組(13～16℃)和低溫組(P=0.45＞0.05)則沒有顯著差異。說明在越冬期和產(chǎn)卵期溫度條件下，WSSV感染能力和致病力均有所下降。三個(gè)不同溫度組中，對蝦半數(shù)致死時(shí)間(TL50)低溫組最長(13.5d)，中溫組次之(11.5d)，高溫組明顯短于其他兩組，只有6d，表明低溫減緩了WSSV感染中國對蝦的進(jìn)程，