PTEN對胰島素抵抗的骨骼肌細(xì)胞調(diào)亡的影響及吡格列酮的干預(yù)研究.pdf

1、2型糖尿病的主要發(fā)病機(jī)制為胰島素抵抗。胰島素抵抗主要發(fā)生在受體后信號(hào)傳導(dǎo)障礙。PI-3K/PKB/AKt通路為胰島素信號(hào)的主要傳導(dǎo)通路，發(fā)生胰島素抵抗時(shí)，該通路活性是降低的。該通路也是促進(jìn)細(xì)胞增殖、生長、存活的主要通路[1]。第10號(hào)染色體缺失并與張力蛋白同源的磷酸酶(phosphatase and tensionhomolog deleted on chromosome ten，PTEN)參與PI3-K通路已被證明有胰島素信號(hào)傳導(dǎo)的負(fù)

2、面作用[2]。PTEN是PI3K/PKB/AKt通路的一個(gè)重要的負(fù)性調(diào)控因子。PTEN/PI3K/Akt構(gòu)成一個(gè)重要途徑，調(diào)節(jié)多種生物過程，如細(xì)胞凋亡，代謝，細(xì)胞增殖和細(xì)胞生長[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)PTEN激活，可抑制AKt活性和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[4]。
　　 吡格列酮屬于噻唑烷二酮(vthia-zolidinedione，TZD)類胰島素增敏劑，其主要作用機(jī)理為激活脂肪、骨骼肌和肝臟等胰島素作用組織的過氧化物酶體增殖物激活受體

3、γ(PPAR-γ)，增加靶細(xì)胞對胰島素的敏感性，降低胰島素抵抗。PTEN啟動(dòng)子上游10kb處有兩個(gè)PPARγ的結(jié)合位點(diǎn)，被PPARγ激動(dòng)劑激活的PPARγ可通過與這兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合促進(jìn)PTEN的表達(dá)[5]。本研究觀察吡格列酮干預(yù)的胰島素抵抗大鼠骨骼肌細(xì)胞PTEN和Akt磷酸化蛋白的表達(dá)和細(xì)胞凋亡。從而探討PTEN與胰島素抵抗和細(xì)胞凋亡之間關(guān)系及其藥物作用機(jī)制。
　　 材料與方法：
　　 傳代培養(yǎng)大鼠骨骼肌細(xì)胞，棕櫚酸作用

4、于細(xì)胞制備胰島素抵抗模型，吡格列酮作用于胰島素抵抗模型的細(xì)胞進(jìn)行藥物干預(yù)，給予胰島素刺激15min。設(shè)立正常細(xì)胞組(C組)、胰島素抵抗組(IR組)、胰島素抵抗+吡格列酮組(IR+TZDs組)。Western blot方法檢測各組PTEN、PTEN磷酸化、Akt磷酸化的表達(dá)。流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率。
　　 結(jié)果：
　　 1、胰島素抵抗組與正常細(xì)胞組比較PTEN、PTEN磷酸化的蛋白表達(dá)增加，p-AKt蛋白表達(dá)減少。<

5、br>　　 2、吡格列酮作用于胰島素抵抗組細(xì)胞進(jìn)一步增加PTEN、PTEN磷酸化蛋白表達(dá)，p-AKt蛋白表達(dá)增加。
　　 3、胰島素抵抗組與正常組比較凋亡明顯增多，吡格列酮作用于胰島素抵抗組進(jìn)一步加重細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)論：
　　 1、胰島素抵抗骨骼肌細(xì)胞PTEN及其磷酸化表達(dá)增加，影響細(xì)胞凋亡。
　　 2、PTEN基因可通過抑制AKt磷酸化參與胰島素抵抗的發(fā)生。
　　 3、吡格列酮可增加Akt