牛奶中青霉素殘留的微生物學(xué)檢測技術(shù)研究及應(yīng)用.pdf

1、青霉素是獸醫(yī)臨床上廣泛使用的一類抗生素，一般采用乳房內(nèi)注射的用藥途徑來治療和預(yù)防奶牛的乳腺炎，而由此引起的牛奶中青霉素殘留是一個(gè)全球性的問題。由于牛奶中青霉素殘留對消費(fèi)者健康的危害及青霉素耐藥性菌株的產(chǎn)生，對牛奶中青霉素殘留的檢測和控制是目前世界各國政府所關(guān)注的問題。而目前我國對牛奶中青霉素殘留檢測的方法的靈敏度達(dá)不到我國對牛奶中青霉素殘留的最高殘留限量的要求，有必要對牛奶中青霉素殘留的檢測方法進(jìn)行研究，以達(dá)到世界先進(jìn)水平。 本

2、論文主要研究了當(dāng)前國外先進(jìn)的牛奶中青霉素殘留的檢測方法，并建立牛奶中青霉素殘留的微生物檢測技術(shù)，且應(yīng)用于我國的殘留監(jiān)控計(jì)劃中去，推動我國牛奶中青霉素殘留檢測技術(shù)與國際接軌，保證國內(nèi)牛奶安全和消費(fèi)者的身體健康。 目前國外常用的牛奶中青霉素殘留檢測的微生物學(xué)檢測方法有微生物抑制法、微生物受體法和酶比色法。微生物抑制法有嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片法、戴爾沃-p法、戴爾沃-p-多項(xiàng)測試法、CHARM抑制法、CHARM農(nóng)場測試法、嗜熱鏈球菌Va

3、lioT101法、亮黑還原法、藤黃微球菌法、三磷酸腺苷法、三碟法、六碟法等，而微生物受體法主要是CHARMⅡ法，酶比色法主要是Penzyme法。 本論文建立了嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片法和CHARMⅡ法，用于檢測牛奶中的青霉素殘留。CHARMⅡ法采用3H或14C標(biāo)記的青霉素和牛奶中的青霉素殘留在細(xì)菌表面的特異性受體位點(diǎn)進(jìn)行競爭，樣品經(jīng)離心除去上清液，沉淀在閃爍液重新懸浮，用液體閃爍計(jì)數(shù)器來測量其放射性，然后將樣品的放射性與判定點(diǎn)比較，

4、樣品的放射強(qiáng)度與樣品中殘留物的含量成反比。此法的檢測限為2ppb，檢測時(shí)間為15分鐘。嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片采用嗜熱脂肪芽胞桿菌作為測試菌株，培養(yǎng)溫度為55±2℃，并對牛奶樣品進(jìn)行82±2℃加熱處理，以去除牛奶中存在的干擾物質(zhì)，方法的檢測限為4ppb，檢測時(shí)間為3-4小時(shí)，并采用青霉素酶法對青霉素殘留進(jìn)行初步確認(rèn)。 這二個(gè)方法檢測限和精密度均能達(dá)到我國對牛奶中青霉素殘留監(jiān)控的最高殘留限量的要求，并應(yīng)用于國家殘留監(jiān)控計(jì)劃中去，200