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文檔簡介
1、目的:
研究Babl/c小鼠Renca異位腎癌模型經(jīng)IL-2及COX-2抑制劑NS-398作用的腫瘤生長情況、CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)在荷瘤小鼠外周血、脾臟及腫瘤局部中的變化,探討COX-2抑制劑增強腎癌免疫治療的作用及機制,為COX-2抑制劑輔助治療腎癌的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
方法:
1.以小鼠Renca細胞株異位接種于Babl/c小鼠,建立小鼠Renca異位腎癌模型。
2、r> 2.隨機分成四組,不同組別采取不同給藥方法,即A組為IL-2組,B組為NS-398組,C組為IL-2+NS-398組,D組為PBS空白對照組。
3.分別在給藥第14天及第28天提取各組荷瘤小鼠外周血,用流式細胞術(shù)檢測Treg的變化。
4.切取荷瘤小鼠瘤體及脾臟,運用免疫組化(immunohistochemistry,IH)方法檢測小鼠脾臟和腫瘤局部的Treg的變化。
結(jié)果:
1.小鼠種植瘤
3、體經(jīng)HE染色病理檢查,顯微鏡下可見大量異型細胞并見核分裂相,腫瘤細胞呈圓形、棱形或不規(guī)則形,細胞體積較大,細胞質(zhì)較少,核大、深染,細胞排列紊亂,可見實體樣結(jié)構(gòu),間質(zhì)少,呈浸潤性生長,周圍無包膜結(jié)構(gòu)證實Babl/c小鼠種植瘤體符合異位腎癌特征,可以使用Babl/c小鼠來源的腎癌細胞株(Renca)建立小鼠異位腎癌模型。
2.Babl/c小鼠異位腎癌在不同藥物處理后腫瘤體積出現(xiàn)明顯變化,A組經(jīng)IL-2治療后10天內(nèi)腫瘤體積仍有緩慢
4、增長,16天后瘤體開始減小,減小幅度較大;B組單用NS-398,腫瘤仍在增長,但較對照組增長較慢;C組為聯(lián)合用藥組,腫瘤在第六天出現(xiàn)減小,隨后一直持續(xù)到實驗結(jié)束,經(jīng)多組t檢驗,與其他組具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
3.COX-2抑制劑能下調(diào)荷瘤小鼠外周血、腫瘤及脾臟中Treg的表達,且與IL-2聯(lián)合有協(xié)同作用(P<0.05)。
結(jié)論:
1.使用Babl/c小鼠來源的Renca細胞建立Babl/c小鼠異位
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