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1、目的:近年來(lái)研究表明,環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和生長(zhǎng)抑素在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起十分重要的作用,但特異性COX-2抑制劑和生長(zhǎng)抑素對(duì)肝癌的防治作用及其機(jī)制尚未十分明了。本課題研究特異性COX-2抑制劑NS-398和生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物奧曲肽對(duì)人肝癌細(xì)胞系SMMC-7721增殖、凋亡的影響,旨在明確兩種非細(xì)胞毒性藥物對(duì)肝癌有無(wú)協(xié)同抗癌作用,為臨床聯(lián)合應(yīng)用特異性COX-2抑制劑和奧曲肽防治肝癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
2、 方法:SMMC-7721細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)于含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,NS-398組(培養(yǎng)液中NS-398終濃度為1×10-9~1×10-4mol/L),奧曲肽組(培養(yǎng)液中奧曲肽終濃度為1×10-10~1×10-5mol/L),聯(lián)合用藥組(NS-398和奧曲肽終濃度分別為1×10-5mol/L和1×10-6mol/L),對(duì)照組加入等容量的培養(yǎng)液和DMSO。采用四氮唑鹽(MTT)比色法觀察細(xì)胞增殖活力改變,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)
3、胞凋亡百分率。 結(jié)果:1、MTT顯示NS-398和奧曲肽均在一定范圍內(nèi)呈濃度和時(shí)間依賴性地抑制SMMC-7721細(xì)胞的增殖;聯(lián)合用藥組抑制率顯著高于單用NS-398或奧曲肽(P<0.01),金正均方法提示q>1.15,提示兩藥聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同抑制肝癌細(xì)胞增殖效應(yīng),并隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng)。2、流式細(xì)胞儀測(cè)定顯示NS-398(1×10-5mol/L)、奧曲肽(1×10-6mol/L)和兩藥聯(lián)合作用于SMMC-7721細(xì)胞24h后,3
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