HMGA2在膀胱癌中的表達及與上皮─間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究.pdf

1、高遷移率族蛋白A（High mobility groupA ，HMGA）是與染色體結(jié)合的非組蛋白，含3個AT-溝DNA結(jié)合域及1個酸性末端，能與DNA 結(jié)合使其彎曲、拉伸、成環(huán)或解鏈而更有利于與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，或與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性，故又稱構(gòu)架轉(zhuǎn)錄因子。在調(diào)節(jié)基因表達，病毒的整合，胚胎分化，細胞周期，腫瘤轉(zhuǎn)化等生物過程中有重要作用。HMGA家族由HMGAla、HMGA1b、HMGA1c和HMGA2四種蛋白質(zhì)組成，前3種蛋白質(zhì)由同

2、一個基因編碼，該基因定位在染色體6p21，只是轉(zhuǎn)錄后的可變剪接使這3種蛋白質(zhì)長度有所不同，HMGA2由一個斷裂基因編碼，該基因定位在染色體12q14-15。在正常細胞中，HMGA只限于在胚胎發(fā)生階段表達，隨著器官發(fā)生的逐步進行，HMGA的含量也將隨之減少，在分化成熟細胞HMGA水平非常低或檢測不到。最近研究顯示HMGA2與腫瘤發(fā)生進展密切相關(guān)。
　　 HMGA2基因重組是人類良性間充質(zhì)腫瘤的重要特征，并發(fā)現(xiàn)HMGA蛋白過度表達也

3、見于人類許多上皮來源的惡性腫瘤如乳腺癌，胰腺癌，肺癌，口腔鱗癌，且與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為預(yù)后的指標。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-MesenchymalTransition，EMT）是指上皮細胞在形態(tài)學(xué)上發(fā)生成纖維細胞轉(zhuǎn)變并獲得遷移、增值的能力，它是一種基本的生理病理現(xiàn)象，在胚胎發(fā)育、組織發(fā)生中起重要作用。此外，EMT也存在于多種病理過程中，如傷口愈合過程、腎臟纖維化、腫瘤進展及轉(zhuǎn)移。最近研究顯示HMGA2介導(dǎo)EMT 與腫瘤

4、進展、浸潤相關(guān)。目前關(guān)于HMGA2在膀胱癌中的表達的研究還沒有報道。本研究探討HMGA2在膀胱癌患者中的表達及其臨床意義及與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性。
　　 第一部分 HMGA2在膀胱癌中的表達及臨床意義
　　 目的：研究HMGA2在膀胱尿路上皮癌中的表達，并分析其與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。
　　 方法：采用實時熒光定量PCR和Western-blot法檢測44例膀胱尿路上皮癌組織和18例相應(yīng)正常組織中HMGA2

5、 mRNA和蛋白的表達，免疫組化檢測148例膀胱尿路上皮癌石蠟切片和相應(yīng)30例正常組織中HMGA2蛋白的表達，并結(jié)合臨床資料進行分析。
　　 結(jié)果：實時熒光定量PCR和Western-blot結(jié)果顯示膀胱癌組織中HMGA2 mRNA和蛋白的表達明顯高于正常組織（P<0.001）。HMGA2的表達還與膀胱癌的病理分級(P<0.001)和臨床分期有關(guān)（P=0.002）。Western-blot顯示在正常組織中未見HMGA2蛋白表達，

6、而在腫瘤中都有表達。免疫組化結(jié)果顯示HMGA2 在52％（77/148）膀胱癌中表達，而30 例正常組織中均不表達，兩者比較有顯著性差異（P<0.001）。
　　 HMGA2的高表達與病理分級（P<0.001）和臨床分期（P=0.003）有關(guān)。HMGA2的高表達與非肌層浸潤性膀胱癌患者術(shù)后無復(fù)發(fā)生存及無進展生存有關(guān)（分別為P<0.001，P=0.0004）。采用COX模型多因素回歸分析，發(fā)現(xiàn)HMGA2 是影響患者術(shù)后復(fù)發(fā)（P<0

7、.001）和進展（P=0.006）的獨立預(yù)后因素。
　　 結(jié)論：與正常組織相比，HMGA2在膀胱癌組織中的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平都有過表達。
　　 HMGA2的表達還與腫瘤的分級和肌層浸潤呈正相關(guān)。HMGA2過表達是預(yù)測患者術(shù)后復(fù)發(fā)和進展的潛在標記物。
　　 第二部分 HMGA2和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化標記物在膀胱癌中的表達及其相關(guān)性分析
　　 目的：研究HMGA2、上皮-間質(zhì)標記物（E-cadherin、N-cadhe

8、rin）在膀胱癌中表達，并分析其相關(guān)性，從而研究HMGA2在膀胱癌進展及侵襲中的作用。
　　 方法：免疫組化檢測44例肌層浸潤性膀胱癌石蠟切片和相應(yīng)15 正常組織中HMGA2、E-cadherin和N-cadherin蛋白的表達，并結(jié)合臨床資料進行分析。
　　 結(jié)果：肌層浸潤性膀胱癌中HMGA2、E-cadherin和N-cadherin表達的陽性率分別為72.7％、25％、59.1％，而在正常組織中分別為0％、86.7