阿霉素-透明質酸納米顆粒對口腔鱗癌作用的初步研究.pdf

1、[目的]制備阿霉素-透明質酸納米顆粒并探索其于體外靶向殺傷口腔鱗癌細胞的作用及其經裸鼠瘤體給藥后，口腔鱗癌病灶及易損器官的藥物分布，確定阿霉素-透明質酸納米顆粒治療口腔鱗癌的靶向性。 [方法]本研究分為三部分：實驗一利用碳化二亞胺作為交聯劑，共價連接脫氧膽酸到透明質酸上制備透明質酸-脫氧膽酸耦合物，通過超聲法制備納米粒，利用透射電子顯微鏡觀測納米粒的形態(tài)和粒徑的分布。利用納米粒內部疏水相互作用，把阿霉素裝載進入納米粒的疏水內核中

2、，制備阿霉素-透明質酸納米顆粒，利用紫外分光光度計檢測不同載藥量阿霉素-透明質酸納米顆粒體外釋藥性能。實驗二在體外培養(yǎng)的口腔鱗癌細胞中分別加入阿霉素濃度為0.5、1.0、5.0、10.0mg/L的阿霉素-透明質酸納米顆粒，作用24、48h后利用倒置顯微鏡檢測口腔鱗癌細胞凋亡形態(tài)學變化，利用MTT檢測阿霉素-透明質酸納米顆粒對腫瘤細胞的靶向殺傷作用，濃度為5.0、10.0mg/L時分別作用6、12、24、48h，利用流式細胞儀檢測阿霉素-

3、透明質酸納米顆粒對腫瘤細胞的凋亡作用。實驗三將36只口腔鱗癌裸鼠隨機分為阿霉素組和阿霉素-透明質酸納米顆粒組，分別將阿霉素濃度為1.0、10.0mg/L的兩組藥物按劑量1mg/kg通過瘤體給藥，每組設三個平行組。每組給藥1、5、15h后處死裸鼠，取瘤體外正常組織、瘤體、心、肝、脾、腎組織各1.0g，用高效液相色譜法檢測組織內的藥物濃度，對所得數據進行t檢驗。 [結果]第一部分電鏡觀測顯示自聚集體的外表近似球形，形態(tài)完整具有很窄的

4、粒徑分布。在前5個小時內，不同載藥量的納米粒突釋效應比較顯著，后面部分的釋放曲線則比較平緩，緩釋效應突出。第二部分阿霉素-透明質酸納米顆粒組癌細胞出現膜小泡、凋亡小體等細胞凋亡的特征性改變；MTT試驗顯示阿霉素-透明質酸納米顆粒對腫瘤細胞的殺傷作用優(yōu)于游離阿霉素(p<0.01)；流式細胞術示相同濃度阿霉素-透明質酸納米顆粒細胞凋亡百分率隨時間增加而升高(P<0.01)，相同作用時間凋亡率隨濃度增加而升高(p<0.05)。第三部分作用1、

5、5、15h，肝、心、脾、肺中阿霉素-透明質酸納米顆粒組阿霉素含量均低于游離阿霉素(P<0.01)，而瘤體組織中阿霉素-透明質酸納米顆粒含量高于游離阿霉素(P<0.01)。 [結論]1.阿霉素-透明質酸納米顆粒中阿霉素的釋放顯著依賴于納米球的載藥量，載藥量越高，藥物釋放的越緩慢。2.阿霉素-透明質酸納米顆?？商禺愋宰R別腫瘤細胞，并實現其殺傷作用，并隨時間延長殺傷作用增加。3.阿霉素-透明質酸納米顆粒對口腔鱗癌具有靶向作用，可降低阿