SD大鼠神經(jīng)祖細(xì)胞體外培養(yǎng)及EGF、bFGF、LIF的作用.pdf

1、目的：通過對(duì)新生Sprague-Dawley（SD）大鼠海馬組織進(jìn)行體外培養(yǎng)擴(kuò)增，獲得一定數(shù)量的神經(jīng)祖細(xì)胞（Neural progenitor cells, NPCs），觀察NPCs的生長情況，分析表皮生長因子（EGF）、成纖維生長因子（bFGF）、白血病抑制因子（LIF）獨(dú)立或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)NPC增殖的作用。方法：機(jī)械法分離新生SD大鼠海馬組織后培養(yǎng)3代獲得EGF/bFGF敏感的NPCs，等分為6個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別添加EGF、bFGF、EGF+

2、LIF、bFGF+LIF、bFGF+EGF、bFGF+EGF+LIF繼續(xù)培養(yǎng)，第9代末（60 d）細(xì)胞鑒定并計(jì)數(shù)，對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行比較。結(jié)果：（1）機(jī)械法分離得到的NPCs可以在體外以懸浮神經(jīng)球的方式長期培養(yǎng)擴(kuò)增；（2）EGF、EGF+LIF組NPCs培養(yǎng)到第6代末無法繼續(xù)傳代培養(yǎng)；其余4組繼續(xù)傳代培養(yǎng)到第9代末仍可見Nestin抗體陽性的神經(jīng)球形成，并且有分化為三種神經(jīng)終末細(xì)胞的潛能；（3）細(xì)胞培養(yǎng)第9代末，EGF+bFGF組較bFGF