γ-分泌酶抑制劑GSI-XXI對兒童原代急性B淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞作用的研究.pdf

1、目的：
　　研究γ-分泌酶抑制劑GSI-XXI對兒童原代急性B淋巴細(xì)胞性白血病(B-ALL)細(xì)胞生長的影響,并初步探討其作用機制,為B-ALL患兒尋找新的治療方案提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.以2012年5月至2013年1月間我院兒科收治的18例初診B-ALL患兒作為研究對象,利用人淋巴細(xì)胞分離液分離出原代B-ALL細(xì)胞,將其分為以下2組:
　　(1)對照組;
　　(2)GSI-XXI組。
　　

2、分別體外培養(yǎng)72h后,采用CCK-8法檢測GSI-XXI對原代B-ALL細(xì)胞生長的影響。
　　2.應(yīng)用SABC法檢測上述初診B-ALL患兒的骨髓涂片標(biāo)本中Notch1蛋白的表達。對照組為同期收治的15例非惡性血液病患兒。
　　3.應(yīng)用RT-PCR法檢測原代B-ALL細(xì)胞中Notch信號通路相關(guān)分子Notch1、Notch2的表達水平。
　　4.為了探討GSI-XXI對傳統(tǒng)化療藥物敏感性的影響及與Notch1蛋白表達的關(guān)

3、系,根據(jù)Notch1蛋白表達情況,將B-ALL細(xì)胞分為Notch1陽性組和Notch1陰性組,每組根據(jù)所加的藥物分別分為以下4組:
　　(1)柔紅霉素組;
　　(2)(GSI-XXI+柔紅霉素)組;
　　(3)長春新堿組;
　　(4)(GSI-XXI+長春新堿)組。
　　將各組分別進行體外培養(yǎng),通過CCK-8法觀察各組原代B-ALL細(xì)胞的生長情況;同時分析GSI-XXI與柔紅霉素長或春新堿聯(lián)合應(yīng)用對原代B-

4、ALL細(xì)胞生長抑制水平變化與患兒臨床危險度分型的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.GSI-XXI干預(yù)后,B-ALL細(xì)胞的存活率為(47.56±2.00)％,對照組細(xì)胞的存活率為(67.91±3.00)%。與對照組比較,GSI-XXI可以顯著抑制B-ALL細(xì)胞的生長(P<0.05)。
　　2.收集的18例B-ALL患兒骨髓白血病細(xì)胞涂片中,Notch1受體蛋白陽性表達率為27.8%(5/18),高于對照組非惡性血液疾病患兒陽性

5、表達率13.3%(2/15),兩組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　3.原代B-ALL細(xì)胞中存在Notch1、Notch2基因表達,檢測到4例B-ALL中Notch1、Notch2均陽性表達。
　　4.Notch1蛋白陽性組中,GSI-XXI可以增強柔紅霉素的化療效果(P<0.05),對長春新堿卻沒有這種作用(P>0.05);Notch1蛋白陰性組,GSI-XXI均沒有增強柔紅霉素和長春新堿對原代B-ALL細(xì)胞的

6、化療效果(P>0.05)。在B-ALL高危組中,GSI-XXI可以增強B-ALL細(xì)胞對柔紅霉素的抗腫瘤效應(yīng)(P<0.05),對長春新堿卻沒有這種作用(P>0.05);而在中危組和低危組中,GSI-XXI均沒有提高B-ALL細(xì)胞對長春新堿和柔紅霉素的化療敏感性(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.γ-分泌酶抑制劑GSI-XXI可以顯著地抑制兒童原代B-ALL細(xì)胞的生長。
　　2.原代B-ALL細(xì)胞中存在Notch1、N