實(shí)時(shí)熒光多重探針連接再擴(kuò)增技術(shù)應(yīng)用于染色體非整倍體的快速產(chǎn)前診斷.pdf

1、本論文運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光多重探針連接再擴(kuò)增技術(shù)以及相關(guān)的數(shù)據(jù)分析方式，致力于實(shí)現(xiàn)對(duì)染色體非整倍胎兒的快速產(chǎn)前診斷。 第一章，綜述了染色體非整倍體的產(chǎn)前診斷現(xiàn)狀，介紹了傳統(tǒng)細(xì)胞生物學(xué)診斷方法以及新興分子生物學(xué)診斷方法的技術(shù)特點(diǎn)與應(yīng)用現(xiàn)狀。針對(duì)目前分子生物學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)，提出了實(shí)時(shí)熒光多重探針連接再擴(kuò)增技術(shù)的思路。 第二章，敘述了實(shí)時(shí)熒光多重探針連接再擴(kuò)增技術(shù)的原理與設(shè)計(jì)，以及檢測(cè)反應(yīng)體系與數(shù)據(jù)分析體系的建立?？疾炝硕鄠€(gè)反

2、應(yīng)因素對(duì)雜交連接體系和實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)體系的影響，建立了較優(yōu)的反應(yīng)體系。同時(shí)提出了兩種基于不同原理的數(shù)據(jù)結(jié)果分析處理方法對(duì)儀器輸出結(jié)果進(jìn)行雙向掃描，以期使分析結(jié)果更加全面、簡(jiǎn)明和準(zhǔn)確。 第三章，進(jìn)行了實(shí)時(shí)熒光多重探針連接再擴(kuò)增技術(shù)在非整倍體快速產(chǎn)前診斷中的臨床應(yīng)用評(píng)估。通過(guò)第二章中建立的檢測(cè)反應(yīng)體系和數(shù)據(jù)結(jié)果分析體系對(duì)32例21號(hào)染色體三體臨床標(biāo)本、11例18號(hào)染色體三體臨床標(biāo)本、1例13號(hào)染色體三體臨床標(biāo)本以及100例正常對(duì)

3、照進(jìn)行了區(qū)分，結(jié)果顯示所有的三體標(biāo)本都可以與正常對(duì)照顯著區(qū)分，顯示了該項(xiàng)技術(shù)優(yōu)越的臨床應(yīng)用潛力。更進(jìn)一步的分辨率研究顯示本技術(shù)可以顯著區(qū)分1.2倍的染色體劑量變化，具備檢測(cè)嵌合體的能力與應(yīng)用于無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷的潛力。 本論文提出了實(shí)時(shí)熒光多重探針連接再擴(kuò)增技術(shù)的原理，并且建立了該技術(shù)的檢測(cè)反應(yīng)體系與數(shù)據(jù)分析體系，最終通過(guò)初步臨床評(píng)價(jià)顯示了這項(xiàng)技術(shù)具有結(jié)果準(zhǔn)確、成本低廉、操作簡(jiǎn)單、快速高通量等優(yōu)點(diǎn)，有望為染色體非整倍體的產(chǎn)前診斷提供有