利用多重?zé)晒舛縋CR產(chǎn)前快速診斷胎兒非整倍體的研究.pdf

1、利 用 多重 熒光 定 量 PCR 產(chǎn) 前 快速 診 斷胎 兒非 整 倍 體 的研 究R a P1dP r e n a t a ld i a g n o s i so fa n e u p l o i d yu s in gm u1t1P1exf1u o r e s e e n e eS T 卜 P C R上海 市 第 一 婦 嬰保健 院婦 產(chǎn) 科 學(xué)系 業(yè)名 : 嚴(yán) 曉玲院 專 姓指 導(dǎo) 教 師 : 段 濤 教 授二 零 一 一 年

2、十 月十 日利 用 多重?zé)晒舛?P c R 產(chǎn)前 快速診 斷胎 )L非 整倍 體的研 究中文摘 要將 PCR 技 術(shù) 運(yùn) 用 在 產(chǎn) 前 診 斷 領(lǐng) 域 迄 今 己近 20 年 了 ， 隨著 技 術(shù) 的 推 廣 和 使 用范 圍 的 增 加 ，其 有 效 性 及 高 效 性 逐 步 獲 得 大 家 的認(rèn) 同 ，甚至 有 取 代 細(xì) 胞 學(xué) 核 型分 析 的趨 勢 。通 常 ，PC R 可 在 獲 取 羊 水 、 絨 毛 或 胎 兒 組

3、 織 標(biāo) 本 后 的 24一 36 小 時(shí)即獲 得 診 斷報(bào) 告 ，若 胎 兒 正 常 可 緩 解 孕 婦 及 家庭 的焦 慮 ，若 胎 兒 有 染 色 體 異 ?？?即 時(shí) 終 止 。國 內(nèi)也 有 較 多 學(xué) 者 從 事 使 用 PC R 產(chǎn) 前 診 斷胎 兒 非 整 體 的研 究 ，但 在 ST R 位點(diǎn) 的選 擇 及 使 用 數(shù) 目等 方 面 的研 究 卻 不 多 ，本 文 從 STR 新位 點(diǎn) 在 正 常 無 關(guān) 個(gè) 體外 周

4、血.中 的雜 合 度 及 多膚 信 息 含 量 入 手 ， 建 立 ST R一 PC R 的實(shí) 驗(yàn) 方 法 。使 用 多 種ST R 位 點(diǎn) 組 合 在 13 、18 、21 號(hào) 染 色 體 異 常 的標(biāo) 本 中探 索 有 效 的 組 合 方 式 ，最 后 ，設(shè) 計(jì)兩 種 探 針 組 合 在 產(chǎn) 前 孕 中期 羊 水 中檢 測 21 號(hào) 染 色 體 的數(shù) 目， 并 和 細(xì) 胞 核 型學(xué) 分 析 結(jié) 果 比較 ，計(jì) 算 ST R一 PCR

5、 方 法 在 產(chǎn) 前 診 斷 中 的檢 出率 ，為 臨 床 進(jìn) 行 多 種新 研 究 建 立 可 行 的方 法 學(xué) 平 臺(tái) 。第一部分 多重?zé)晒?ST R 新位 點(diǎn)在 50 例無關(guān)個(gè) 體 中 的研 究目的 應(yīng)用 13、18、21 號(hào)染色體上 17 個(gè) sTR 新位點(diǎn) (D13s796、D13ssoo、D13 5 8 8 6 、 D 18 5 8 7 7 、 D 18 5 8 5 1 、 D 1 8 5 8 4 7 、 D 18 5 8

6、1 9 、 D 2 1S l lL 、 D Z IS 1 4 O g 、D Z1518 0 9 、 D 2 15 2 O 5 2 、 D 2 1S 19 9 4 、 D Z IS 14 4 6 、 I )2 15 1 4 3 5 、 D 2 1 5 1 1 、、 DZ1514 32 、I )2 15 1442 )， 了 解 新 位 點(diǎn) 在 診斷 染 色 體 數(shù) 目中的 應(yīng) 用 價(jià) 值 。方 法 在50 例正常人血清標(biāo)本中通過 l >

7、;c l之 擴(kuò)增基因測序的方法，用 sPsslZ.o軟 件 直 接 計(jì)算 新 位 點(diǎn) 雜 合 度 (Il ) 和 多膚 信 息 含 量 (曰C) ，并對(duì) 13、18 、21 染 色 體數(shù) 目進(jìn) 行 診 斷 。結(jié) 果 13 號(hào) 染色體中 s一 ’ 1 2位點(diǎn) 一 0.6一 0.7J， 尸 zc0.65一 0.7。18 號(hào)染色體中 sTR位 點(diǎn) H0.69一 0.8 1，尸 jC0.68一 0.8 。 2 1 號(hào)染 色 體 中 5 1 ’