腹膜間皮細(xì)胞膜的制備及防治創(chuàng)傷性腹膜粘連的實驗研究.pdf

1、目的：腹膜粘連的原因很多，既往認(rèn)為一般由于手術(shù)損傷、炎癥反應(yīng)、異物殘留、組織缺血等外在因素有關(guān)，本論文與既往研究有所不同，就創(chuàng)傷性腹膜粘連的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)進(jìn)行了研究，得出了間皮細(xì)胞損傷是腹膜粘連的起始原因，并為了保證間皮細(xì)胞在局部的數(shù)量及穩(wěn)定性，又研究了自體纖維蛋白膜來作為間皮細(xì)胞移植的載體，以便為了更好的防治創(chuàng)傷性腹膜粘連的形成，本論文就是將實驗所得到的纖維蛋白-間皮細(xì)胞膜移植在大鼠腹腔創(chuàng)面上，來觀察其在腹膜粘連過程中的防治作用。

2、 方法：第一部分中我們制備兩組動物模型，一組為創(chuàng)傷粘連組，另一組為空白對照組，分階段處死，進(jìn)行腹膜粘連情況的觀察，粘連分級，結(jié)果進(jìn)行Ridit統(tǒng)計學(xué)分析，組織行HE染色觀察；第二部分中我們用胰蛋白酶組織消化法分離來源于大網(wǎng)膜的腹膜間皮細(xì)胞，并進(jìn)行細(xì)胞爬片的制備及免疫組化染色，進(jìn)行間皮細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒別；第三部分中我們用凝血酶及血漿制備了纖維蛋白膜，用相關(guān)設(shè)備測定了它的物理性能，并通過將其植入到大鼠肌肉的方法研究了它的生物相容性及降解性；第

3、四部分中我們在纖維蛋白膜上接種了間皮細(xì)胞并進(jìn)行了培養(yǎng)；在最后的第五部分中我們通過將纖維蛋白-間皮細(xì)胞膜移植在大鼠腹膜創(chuàng)面上來驗證其在防治中的作用，本部分中我們制備了五組動物模型，A組為創(chuàng)傷粘連組，B組為纖維蛋白膜移植組，C組為纖維蛋白-間皮細(xì)胞膜移植組，D組是纖維蛋白-間皮細(xì)胞膜+透明質(zhì)酸鈉組，五組大鼠于術(shù)后分階段處死，進(jìn)行粘連分級，結(jié)果行Ridit統(tǒng)計學(xué)分析，組織行HE染色觀察。 結(jié)論：1.腹膜損傷、間皮細(xì)胞損傷、纖維蛋白滲出

4、、成纖維細(xì)胞過度增殖是粘連形成的病生理基礎(chǔ)，而相鄰部位腹膜的損傷是形成的空間基礎(chǔ)。2.胰蛋白酶大網(wǎng)膜組織消化法可以成功分離腹膜間皮細(xì)胞，并在體外成功的培養(yǎng)原代間皮細(xì)胞，24小時后間皮細(xì)胞大部分貼壁。3.纖維蛋白膜是一種可合成、可降解、具有良好生物相容性并且是無毒、無副作用的生物材料。4.間皮細(xì)胞在纖維蛋白膜上可以正常生長，24小時后大部分可以貼附于其上，之后間皮細(xì)胞逐漸伸展開并變大，兩者相互結(jié)合得到了纖維蛋白-間皮細(xì)胞膜。5.纖維蛋白-