TSP-1活化TGF-β-,1-在慢性移植腎病中作用的實驗研究.pdf

1、目的：研究在CAN過程中TSP-1表達是否增高，是否導(dǎo)致活性TGF-β1增高，阻斷TSP-1介導(dǎo)的TGF-β1活化能否延緩慢性移植腎病的纖維化進程。 方法：依照國際標(biāo)準(zhǔn)CAN實驗大鼠模型，以Fisher大鼠作供者，Lewis大鼠作受者進行同種腎移植。設(shè)單腎切除Lewis大鼠為對照組，慢性移植腎病組中治療組大鼠給予人工合成多肽(LSKL)100μg/d，未治療組大鼠給予生理鹽水。在第4周、第8周、第12周、第16周測定各組大鼠尿蛋

2、白、肌酐變化，第16周觀察移植腎病理改變及免疫組化檢測，RT-PCR測定TSP-1mRNA的表達，生物學(xué)法測定腎組織中活性TGF-β1及總體TGF-β1水平。 結(jié)果：(1)大鼠存活情況：單腎切除組(A組)全部存活；慢性移植腎病未治療組(B組)術(shù)后第22、50、92、109天各死亡1只；慢性移植腎病治療組(C組)術(shù)后第98天死亡1只；(2)移植后治療組24d尿蛋白、血清肌酐水平與未治療組相比明顯降低，差別顯著(P＜0.01)；(3

3、)移植術(shù)后第16周CAN大鼠腎組織中總體TGF-β1、活性TGF-β1水平明顯增高，與單腎切除組相比，相差顯著(P＜0.01)，治療組與未治療組相比，總體TGF-β1含量差別不明顯(P＞0.05)，但活性TGF-β1含量明顯下降，差別顯著(P＜0.01)，治療組(C組)TGF-β1活化率明顯被抑制，與未治療組相比降低了56％(P＜0.01)；(4)移植術(shù)后第16周移植腎組織病理改變(腎小球硬化、間質(zhì)纖維化、腎小管萎縮、血管內(nèi)膜病變)，治

4、療組明顯較輕，與未治療組相比，差別顯著(P＜0.01)；(5)免疫組化方法觀察腎組織TSP-1在單腎切除組無陽性表達，TGF-β1、α-SMA僅有少量表達，而CAN組(治療組、未治療組)TSP-1在腎小管上皮細(xì)胞胞漿、腎小球壁層上皮細(xì)胞內(nèi)陽性表達，在炎性浸潤及纖維化的間質(zhì)區(qū)表達更明顯；兩組TGF-β1陽性表達面積也顯著增強，可見于腎小球系膜細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、腎間質(zhì)細(xì)胞；在CAN組中增厚的腎小球基膜、萎縮變性的腎小管可見明顯的α-SM

5、A表達。治療組、未治療組TSP-1、TGF-β1陽性表達差別不明顯(P＞0.05)，治療組α-SMA表達明顯較未治療組少，差別顯著(P＜0.01)。(6)CAN組腎組織TSP-1mRNA的表達明顯高于單腎切除對照組，差別顯著(P＜0.01)；而在CAN治療組和未治療組中差別不明顯(P＞0.05)。 結(jié)論： 1.慢性移植腎病腎組織內(nèi)TSP-1、TGF-β1存在高表達。 2.TSP-1介導(dǎo)TGF-β1活化是慢性移植腎