內(nèi)毒素致兔急性肺損傷及萘普生干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的：急性肺損傷(ALI)是臨床上常見(jiàn)的危重疾病，因其發(fā)病機(jī)理至今尚未完全清楚，治療相當(dāng)困難，病死率極高。ALI可由多種基礎(chǔ)疾病誘發(fā)，而革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)感染引起的內(nèi)毒素(ET)血癥最為常見(jiàn)。本研究采用一次性靜脈注射ET的方法復(fù)制大耳白兔ALI動(dòng)物模型，通過(guò)對(duì)相關(guān)生理生化、病理學(xué)以及環(huán)氧合酶-2(COX-2)mRNA等指標(biāo)變化的觀察、檢測(cè)，進(jìn)一步研究ET致兔ALI的病理生理變化，探討COX-2、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)失控和微循環(huán)障礙等因

2、素在ALI中的可能致傷機(jī)制，同時(shí)觀察動(dòng)物ET性ALI對(duì)心臟的影響。在干預(yù)組給予萘普生進(jìn)行干預(yù)，研究萘普生對(duì)ET致兔ALI的干預(yù)作用機(jī)制。 方法：24只大耳白兔隨機(jī)分為對(duì)照組(A組)、ET致傷組(B組)、ET致傷+萘普生干預(yù)組(C組)。B、C組經(jīng)頸靜脈一次性注射ET(600μg/kg)致兔ALI，C組在注射ET之前五分鐘先經(jīng)靜脈注射萘普生(50mg/kg)進(jìn)行干預(yù)，A組則僅給予生理鹽水作為對(duì)照。各組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中通過(guò)心電監(jiān)護(hù)儀監(jiān)測(cè)動(dòng)

3、物呼吸頻率(RR)、心率(HR)和血壓(BP)，并在實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)后5、30、60、150、240分鐘等時(shí)點(diǎn)記錄動(dòng)物RR、HR及BP變化，同時(shí)進(jìn)行動(dòng)脈血血?dú)夥治?。測(cè)定實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)后30、60、150、240分鐘等時(shí)點(diǎn)血清血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、內(nèi)皮素-1(ET-1)的含量及血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)活性；測(cè)定實(shí)驗(yàn)前后血清白介素10(IL-10)和白介素19(IL-19)含量。于240分鐘

4、時(shí)處死動(dòng)物，測(cè)定肺組織TXB2、6-keto-PGF1α、ET-1、IL-10、IL-19、丙二醛(MDA)含量；測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)的活性；并測(cè)定心臟組織中TXB2、6-keto-PGF1α、心型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)的含量。行肺臟及心臟組織的病理組織學(xué)觀察，肺組織過(guò)氧化物酶增殖子活化受體γ(PPARγ)的免疫組化檢查，用RT-PCR方法檢測(cè)肺中COX-2mRNA的表達(dá)。取動(dòng)物左肺做肺濕/干測(cè)定。 結(jié)果：B組動(dòng)

5、物在靜注ET后，迅速出現(xiàn)RR增加、HR及BP下降，血氧分壓(PaO2)下降，與A組相比有顯著差異；C組動(dòng)物對(duì)應(yīng)指標(biāo)則相對(duì)平穩(wěn)，與A組相似。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中隨時(shí)間的變化，B組動(dòng)物血清TXB2、6-keto-PGF1α、E-1含量持續(xù)升高，與A組相比有顯著的差異，C組動(dòng)物血清上述指標(biāo)變化則介于A、B兩組之間；B組血清ACE活性在注射ET后30分鐘時(shí)顯著增高；而C組ACE活性則處于較低水平。實(shí)驗(yàn)后B組動(dòng)物肺組織SOD活性較A組下降；TXB2、6-

6、keto-PGF1α、ET-1，LPO、IL-10、IL-19含量增加；C組動(dòng)物對(duì)應(yīng)指標(biāo)與A組接近，但MDA、IL-19含量高于A組。病理學(xué)觀察顯示B組動(dòng)物肺組織呈典型的急性炎癥損害表現(xiàn)；C組動(dòng)物肺組織損傷程度較輕微與A組相似。B、C組動(dòng)物肺組織中PPARγ表達(dá)下降。B、C組動(dòng)物肺組織COX-2mRNA表達(dá)顯著增加，與A組相比有顯著差異。B組動(dòng)物心肌H-FABP含量下降，心臟病理學(xué)檢測(cè)顯示B組動(dòng)物心肌變性、溶解、斷裂，核固縮；A組心肌結(jié)

7、構(gòu)正常，C組有少量心肌細(xì)胞變性壞死，整體上基本正常。 結(jié)論：①經(jīng)靜脈一次性注射ET可以成功復(fù)制家兔的ALI動(dòng)物模型；②動(dòng)物ALI時(shí)血清及肺COX-2活性及肺部COX-2mRNA表達(dá)顯著增加，在ALI發(fā)病過(guò)程中起了重要作用；③氧化損傷和機(jī)體抗氧化應(yīng)激反應(yīng)能力相對(duì)不足是ALI的重要發(fā)病機(jī)制之一；④ALI時(shí)血液及肺組織IL-10，IL-19過(guò)度釋放、失衡；⑤肺臟微循環(huán)障礙是ALI的病理生理變化之一；⑥ALI時(shí)肺組織PPARγ表達(dá)下降；