合成肽Pep-RBD通過干擾Rap1信號(hào)通路抑制人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞粘附功能.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Rap1(Ras相關(guān)蛋白1)是一種單體G-蛋白,俗稱小G蛋白酶,結(jié)合GTP時(shí)為活性形式,結(jié)合GDP時(shí)為失活形式。
　　基于RalGDS-RBD與Rap1GTP和Rap1GDP形式親和力的不同,我們設(shè)計(jì)合成了短肽PepN、Pep-RBD以及帶有CPPs和FAM標(biāo)記的短肽Pep-RBD-CPPs-FAM。流式細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)表明,合成肽Pep-RBD-CPPs-FAM能夠穿透人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞膜,短肽孵育MDA-MB-231

2、細(xì)胞5min后,絕大部分細(xì)胞被標(biāo)記上熒光,Confocal成像實(shí)驗(yàn)證實(shí)了這一結(jié)論。經(jīng)過GST-RBDassay實(shí)驗(yàn)證實(shí),MDA-MB-231細(xì)胞分別經(jīng)Pep-RBD和Pep-RBD-CPPs-FAM孵育不同的濃度和時(shí)間梯度后發(fā)現(xiàn),Rap1GTP水平發(fā)生了顯著降低。同時(shí)GST-RBDassay實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證實(shí),三種合成肽孵育MDA-MB-231細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)RasGTP和RacGTP水平都沒有發(fā)生變化。細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Pep-RBD和P

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