低分子肝素拮抗肝素酶在子癇前期腎小球內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用.pdf

1、第一部分子癇前期患者腎臟損傷的臨床研究
　　目的:探討子癇前期腎臟損傷的嚴(yán)重程度與患者病情及妊娠結(jié)局的關(guān)系。
　　方法:回顧性分析2009年1月~2011年12月在華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院婦產(chǎn)科就診的153例子癇前期患者的臨床資料。根據(jù)尿蛋白檢測(cè)結(jié)果(+)、(2+)、(3+)將子癇前期患者分為A、B、C三組,每組分別為57、35及61例。對(duì)各組患者血壓、血漿白蛋白含量、腎功能及與圍產(chǎn)兒結(jié)局相關(guān)的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析

2、。
　　結(jié)果:C組患者腎功能指標(biāo)血清尿素、肌酐及尿酸含量較其他2組明顯上升,且3組中患者尿蛋白含量越多,血清尿素、肌酐及尿酸值越高;血壓、超聲S/D值亦明顯升高;而血漿白蛋白含量明顯降低,分娩孕周提前,胎盤重量及新生兒體重較輕(p<0.05)。C組新生兒死亡率顯著上升,羊水污染嚴(yán)重。
　　結(jié)論:子癇前期患者尿蛋白含量的多少與腎臟功能的損傷程度、患者病情及圍產(chǎn)兒結(jié)局密切相關(guān),尿蛋白的含量能反映子癇前期的嚴(yán)重程度。
　　第

3、二部分正常妊娠與子癇前期血清對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響
　　目的:研究子癇前期血清對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用,探討子癇前期蛋白尿的形成及腎臟損傷的機(jī)制。
　　方法:收集正常妊娠與子癇前期孕婦血清標(biāo)本各12例,分別將其加入人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行干預(yù),同時(shí)利用胎牛血清作為對(duì)照。1.利用transwell小室及熒光標(biāo)記的牛血清白蛋白檢測(cè)單層人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的屏障功能;2.利用熒光定量PCR方法檢測(cè)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞ET-1

4、的表達(dá);3.利用CCK8試劑盒檢測(cè)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力;4.利用凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡情況。將
　　結(jié)果:與胎牛血清組比較,1.子癇前期血清組中通過(guò)單層人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的牛血清白蛋白濃度明顯升高;2.子癇前期血清組人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞ET-1mRNA表達(dá)顯著升高。3.正常妊娠血清組人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著差異。3組人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與凋亡率無(wú)顯著差異。
　　結(jié)論:子癇前期血清可以破壞腎小球內(nèi)皮

5、細(xì)胞的屏障功能,導(dǎo)致其通透性增加,可能為子癇前期蛋白尿的形成機(jī)制之一。
　　第三部分低分子肝素拮抗外源性肝素酶Ⅲ對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用
　　目的:1.研究低分子肝素對(duì)經(jīng)子癇前期血清干預(yù)的人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用;
　　2.探討低分子肝素拮抗外源性肝素酶Ⅲ對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞通透性損傷的作用。
　　方法:1.在子癇前期血清干預(yù)的人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基中加入低分子肝素,利用transwell小室及熒光標(biāo)記的

6、牛血清白蛋白、熒光定量PCR方法比較低分子肝素干預(yù)前后人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷情況。
　　2.在人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基上清中分別加入胎牛血清、外源性肝素酶Ⅲ和同時(shí)給予外源性肝素酶Ⅲ以及低分子肝素,利用transwell小室及熒光標(biāo)記的牛血清白蛋白檢測(cè)單層人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的屏障功能。比較不同組間人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞通透性的差異。
　　結(jié)果:1.與子癇前期血清組相比,加入低分子肝素后通過(guò)單層人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的牛血清白蛋白濃度明顯降低;

7、人腎小球內(nèi)皮ET-1mRNA的表達(dá)明顯下降;增殖與凋亡能力無(wú)明顯改變。
　　2.給予外源性肝素酶Ⅲ后通過(guò)單層人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的牛血清白蛋白濃度顯著升高,而同時(shí)給予外源性肝素酶Ⅲ和低分子肝素后通過(guò)單層人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的牛血清白蛋白濃度與胎牛血清組相比無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:低分子肝素能夠改善子癇前期血清對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,并拮抗外源性肝素酶Ⅲ對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞通透性的破壞。低分子肝素可能通過(guò)拮抗肝素酶,保護(hù)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞