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1、目的:通過觀察低分子量肝素(LMWH)對(duì)體外培養(yǎng)的外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)數(shù)量和功能的影響,旨在探討EPC參與LMWH治療心血管疾病的作用機(jī)制。 方法:采用密度梯度離心法從外周血獲取單個(gè)核細(xì)胞,培養(yǎng)7d后,洗去非貼壁細(xì)胞,分別加入50,100,200和400KU/L-1的LMWH培養(yǎng)一定時(shí)間(6,12,24,48和72h)后收集細(xì)胞進(jìn)行研究。激光共聚焦顯微鏡鑒定FTTC-UEA-I和DIL-acLDL雙染色陽性細(xì)胞為正在分化的
2、EPC,并在倒置熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)。分別采用MTT比色法,改良的Boyden小室和黏附能力實(shí)驗(yàn)來觀察EPC的增殖能力,遷移能力和黏附能力。 結(jié)果:LMWH能顯著增加外周血EPC數(shù)量,200KU/L-1濃度的LMWH作用48h影響最為顯著(對(duì)照VS200KU/L-1LMWH,0.504±0.097VS0.828±0.109),遷移能力(對(duì)照VS200KU/L-1LMWH,8±6VS40±80)和黏附能力(對(duì)照VS200KU/L-1L
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