可生物降解的注射植入型rac-KET控釋給藥系統(tǒng)體內(nèi)外立體選擇性釋放研究.pdf

1、為延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的作用時(shí)間，采用新穎的藥物釋放系統(tǒng)(drug delivery systams，DDS)不失為一種理想方法，而可生物降解的可注射植入劑(injectableimplants)是其中一種具有良好發(fā)展前景豹釋放系統(tǒng)。注射植入劑以可生物降解的輔料如乳酸一乙醇酸共聚物(DL-PLGA)等為制劑骨架，藥物溶解或混懸于PLGA溶液中得到的一種可供注射的溶液或混懸液。這種可注射溶液的粘度相對(duì)較低，能通過(guò)常用注射針頭，經(jīng)皮下注射給藥后，

2、制劑與體內(nèi)水性環(huán)境接觸，即可形成凝膠狀骨架，藥物通過(guò)骨架向外緩慢釋放。骨架PLGA在體內(nèi)最終可被降解成乳酸和乙醇酸單體。注射植入劑可通過(guò)控制輔料PLGA的用量等，到達(dá)控制藥物持續(xù)釋放時(shí)間的目的。 酮洛芬(ketoprofen，KET)的半衰期比較短，普通口服制劑需一天給藥三次，市售的口服緩釋制劑也至少需一天給藥一次，其它如透皮制劑的給藥一般為每3天一次。由于關(guān)節(jié)炎等慢性病的治療要求病人長(zhǎng)期用藥，制各一次給藥可維持藥效4周以上的長(zhǎng)

3、效制劑顯得十分重要。 在緩控釋制劑的研究中，藥物釋放行為往往作為制劑學(xué)特性的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)，但針對(duì)手性藥物制劑，大多以非立體選擇性的觀點(diǎn)，即只評(píng)價(jià)外消旋體的遞釋行為，而不考察單個(gè)對(duì)映體的釋放行為。因此，以非立體選擇性的觀點(diǎn)研制的長(zhǎng)效制劑不但可能無(wú)法真實(shí)反應(yīng)藥效，有時(shí)甚至產(chǎn)生誤導(dǎo)作用。如果從制劑學(xué)的角度仍將外消旋體藥物當(dāng)作單一化合物來(lái)處理，那么類似沙利度胺(thalidomide)的悲劇可能會(huì)重演。本項(xiàng)研究以外消旋體酮洛芬(rac－

4、KET)為模型藥物，首先采用常規(guī)的非立體選擇性檢測(cè)方法，進(jìn)行rac－KET可注射植入劑制劑研究，然后以立體選擇性拆分方法考察給藥系統(tǒng)體外立體選擇性釋放特點(diǎn)，進(jìn)一步，采用生物樣品中的對(duì)映體的拆分方法評(píng)價(jià)植入劑在生物體內(nèi)的對(duì)映體釋放特性。通過(guò)上述研究，即首先從非立體選擇性釋放評(píng)價(jià)，到對(duì)映體專屬性的體外釋放研究最后到生物體內(nèi)立體選擇性考察，從三個(gè)層次評(píng)價(jià)KET釋放系統(tǒng)的釋藥特性，為最終的創(chuàng)新制劑研究提供依據(jù)。本項(xiàng)蟊的研究成功可為科學(xué)設(shè)計(jì)生物降

5、解型長(zhǎng)效手性藥物制劑的處方，加強(qiáng)有效對(duì)映體的控制釋放，增加有效對(duì)映體生物利用度和降低毒性，提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。一、可生物降解的注射植入型rac-NET控釋給藥系統(tǒng)的制劑學(xué)研究在已有生物降解PLGA徽球研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)對(duì)PLGA中LA與LG不同院例的篩選，不同PLGA濃度對(duì)藥物釋放速率的評(píng)價(jià)，以及PEG400對(duì)藥物突釋的影響等的考察，認(rèn)為PLGA可以作為新穎控釋給藥系統(tǒng)——rac-KET注射植入型控釋給藥系統(tǒng)的骨架。該生物降解型植入劑為

6、溶液制劑，具有在水性介質(zhì)中形成骨架型凝膠的特點(diǎn)。通過(guò)系統(tǒng)研究，成功制備了該長(zhǎng)效控釋制劑;建立了專屬性強(qiáng)的rac—KET。控釋給藥系統(tǒng)的含量測(cè)定方法。含量測(cè)定的方法學(xué)考察結(jié)果顯示：空自輔料不干擾制劑的測(cè)定；在2.0μg/ml～12.0μg/ml的濃度范圍內(nèi)，符合線性要求；高中低三個(gè)濃度的回收率試驗(yàn)結(jié)果為99.0～100.8％。表明所建立的經(jīng)回流提取步驟的測(cè)定方法適用于植入劑的含量測(cè)定，同時(shí)，由于植入劑的藥物釋放要求維持比較長(zhǎng)的時(shí)間，針對(duì)制

7、劑在水性介質(zhì)中形成凝膠的特點(diǎn)，建立了體外釋放度試驗(yàn)?zāi)Ｐ秃歪尫哦鹊臏y(cè)定方法。 rae-NET控釋給藥系統(tǒng)的體外釋放研究表明，不同藥物濃度的植入劑和添加不同量的PEG400能使藥物到達(dá)緩慢釋放的目的，即T80％均大于30天，其中NET濃度為10％的植入劑,其 T80％大于60天。以首日釋放量(以考察突釋效應(yīng))和維持藥物釋放時(shí)間對(duì)植入劑進(jìn)行評(píng)價(jià)， 5％藥物濃度制劑中適量添加PEG400，可以減小植入劑的突釋效應(yīng)，但對(duì)延長(zhǎng)藥物釋放時(shí)間基

8、本無(wú)作用。5％和10％PEG400添加的植入劑，其T80分別為50天和44.2天，而對(duì)照(不添加PEG400，藥物濃度為5％)則為46.5天。總體而言，5％KET(添加5％PEG400)植入劑基本可到達(dá)降低首日突釋效應(yīng)的目的。從不同藥物濃度對(duì)植入劑的酋日釋放量和維持藥物釋放時(shí)間的考察結(jié)果觀察，lO％藥物濃度要優(yōu)于5％和15％藥物濃度的制劑；同時(shí)，與S％NET(添加5％PEG400)植入劑比較，1O％KET不但突釋效應(yīng)比較小，而且維持的對(duì)

9、間更持久。因此，我們認(rèn)為lO％KET植入劑具有比較顯著的延緩藥物釋放的作用。 對(duì)目標(biāo)制劑的數(shù)學(xué)模型研究結(jié)果顯示，rac-KET從植入劑中釋放更符合Cubic方程(MtM =18.5259＋2.0079t-0.0238t2＋0.001t3，方程的相關(guān)系數(shù)為R2=0.9爭(zhēng)4；F=473.23.p<0.001)。二、注射植入型rac-KET控釋給藥系統(tǒng)體外對(duì)映體選擇性釋放研究采用手性流動(dòng)相添加劑萬(wàn)古霉素，以常規(guī)的C18 ODS為色譜柱

10、，建立了可用于分離測(cè)定植入劑體外釋放液中兩個(gè)KET對(duì)映體的RP-HPIC方法。同時(shí)對(duì)所建立的方法進(jìn)行了靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度、線性和專屬性等的評(píng)價(jià)，認(rèn)為該方法完全適用于體外釋放液中KET對(duì)映體豹分離測(cè)定。 通過(guò)考察不同KET濃度植入劑以及不同釋放介質(zhì)pH值對(duì)植入劑的立體選擇性釋放影響，認(rèn)為(1)不同濃度的rac一-KET PLGA植入劑(4％、7％和10％)在pH 7.4的釋放介質(zhì)中均存在照著的立體選擇性釋放現(xiàn)象，其中7％制劑更

11、顯著。(2)不同pH值的釋放介質(zhì)對(duì)制劑的立體選擇性也有比較大的影響，當(dāng)釋放介質(zhì)pH為7.4時(shí)，7％rac-KET植入劑釋放的立體選擇性大于其在pH 10.0的介質(zhì)中釋放。對(duì)映體的這種立體選擇性釋放特性可能與輔料PLGA的可生物降解性有關(guān)。 從數(shù)學(xué)模型研究的角度考察，7％rac-KET植入劑的S-對(duì)映體體外釋放更符合HigucM方程(Mt/m∞=0.134＋0.07736t1/2)，而R-對(duì)映體的釋放則符合一級(jí)方程(1n(1-Mt

12、/M∞)=-0.0145t-0.23)。由于植入劑中對(duì)映體釋放速率的差異最終導(dǎo)致兩者釋放數(shù)學(xué)模型的差異。 三、可生物降解的注射植入型rac-KET控釋給藥系統(tǒng)在大鼠體內(nèi)的立體選擇性釋放研究建立了柱前衍生化的RP-HPLC方法分離測(cè)定大鼠血漿中的R-KET和爭(zhēng)KET。結(jié)果表明：在0.03-10.0μg/ml對(duì)浹體濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系；絕對(duì)回收率大于77％；日內(nèi)日問(wèn)精密度小于13％；對(duì)映體的LOQ(定量限)均為0.03g/ml

13、。 Rac-KET注射植入劑經(jīng)單次大鼠皮下給藥后，可維持有效濃度約8周。與普通注射劑比較，KET植入劑的有效對(duì)映體(S-(+)-KET)I峰濃度顯著降低[G。。25.20μg/ml； 111.13μg/ml(普通注射劑；用純?nèi)軇┡渲?不含輔料)];MRT顯著延長(zhǎng)[10.60天：0.49天(普通注射劑)]；AUC為77.79day．μg/ml，與普通注射劑相當(dāng)(73。54 day．μg/ml)。 Rac-KET impla

14、nts經(jīng)大鼠皮下給藥后，具有S-KET始終顯著高于R-KET的特點(diǎn)(給藥后至釋放結(jié)束)，首個(gè)為25.20±7.45μg/ml(S-KET)和8.96±2.80μg/ml (P-KET)。P-KET血濃度不但比s-對(duì)映體低，而且在較多時(shí)間點(diǎn)無(wú)法被檢出。表明該rae-KET注射植入劑在大鼠體內(nèi)的對(duì)映體濃度存在駐著的差異。 Rac—KET implants組的s/R對(duì)映體比例明顯小于普通注射劑組(純?nèi)軇┡渲?，尤其在5，12和24小時(shí)