反義RNA技術(shù)下調(diào)多胺代謝關(guān)鍵酶抑制大腸癌細(xì)胞增殖及分子機(jī)理研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本文通過(guò)成功構(gòu)建AdoMetDC-α亞基的原核表達(dá)載體pTriEx-AdoMetDC-α，在E.coliJM109(DE3)中誘導(dǎo)表達(dá)并純化了帶有His-Tag的融合蛋白，進(jìn)一步以該重組蛋白為免疫原，制備抗人AdoMetDC抗體，并利用該抗體研究發(fā)現(xiàn)，大腸癌組織中AdoMetDC的表達(dá)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其癌旁正常組織，提示AdoMetDC基因表達(dá)可作為大腸癌病因、基因診斷及基因治療方法研究的靶分子。為進(jìn)一步探討大腸癌基因治療方法，該文利用之前已構(gòu)

2、建的能同時(shí)表達(dá)ODC和AdoMetDC的重組腺病毒表達(dá)載體Ad-ODC-AdoMetDCas，體外證明其能通過(guò)抑制ODC和AdoMetDC的基因表達(dá)，使細(xì)胞周期阻滯于G1期，從而抑制大腸癌細(xì)胞的增殖。進(jìn)一步分子機(jī)理研究證明Ad-ODC-AdoMetDCas可能是通過(guò)抑制cyclin D1啟動(dòng)子活性，使cyclin D1基因表達(dá)下降，并使cyclin D1上游調(diào)節(jié)蛋白β-catenin核聚集下調(diào)而使細(xì)胞增殖停滯于G1期，為探討結(jié)直腸腫瘤的

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