金雀異黃素抑制人結(jié)腸癌細胞增殖及分子機制研究.pdf

1、目的：觀察金雀異黃素(Genistein,GEN)對體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌細胞系(SW-480)細胞增殖抑制作用，探討GEN抗腫瘤作用機制。方法：體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌細胞系(SW-480)細胞，MTT比色法測定GEN對SW-480細胞增殖抑制作用。細胞計數(shù)法測定GEN對SW-480細胞生長的影響：PI染色流式細胞術(shù)(FCM)分析GEN作用后的細胞周期分布和凋亡率；免疫細胞化學SP法檢測GEN對SW-480細胞NF-κβ、Bcl-2、Bax、COX

2、2蛋白表達的影響；Westernblot檢測GEN對ERKl/2磷酸化水平的影響。結(jié)果：　　1.MTT比色法測定結(jié)果顯示，GEN(6.25、12.5、25、50、100gmol/L)對體外培養(yǎng)SW480細胞具有抑制增殖作用，呈劑量的依賴性(p＜0.05)?！　?.細胞計數(shù)法測定顯示，GEN50gmol/L對SW480細胞24h其抑制率為28％，48h其抑制率為50％，第6天其抑制率為86％。對SW480細胞增殖抑制作用呈時間依賴性。

3、　　3.流式細胞術(shù)分析顯示GEN作用于SW480細胞，出現(xiàn)G2/M期阻滯。　　4.免疫細胞化學法檢測結(jié)果顯示，GEN50、100μmol/L對SW480細胞，對照組bcl-2、N-F-κB、COX表達呈強陽性，而處理組呈陰性或弱陽性，陽性率明顯降低，處理組平均灰度值較對照組明顯高(p＜0.05)。對照組Bax呈陰性或弱陽性，而處理組呈強陽性，陽性率明顯增加，處理組平均灰度值較對照組明顯低(p＜0.05)?！　?.WesternBl

4、ot結(jié)果顯示：6.25、12.5、25、50、100amol/L的GEN處理SW480細胞，呈濃度依賴性抑制人結(jié)腸癌細胞ERKl/2蛋白磷酸化。(P＜0.05)。結(jié)論：　　1.金雀異黃素對人結(jié)腸癌細胞系(SW-480)細胞增殖具有抑制作用?！　?.金雀異黃素抑制SW-480細胞生長作用與抑制ERKl/2蛋白磷酸化誘導G2/M期阻滯和細胞凋亡相關(guān)?！　?.金雀異黃素通過下調(diào)SW-480細胞NF-κB、Bcl-2和COX2蛋白的表達，