造血干細(xì)胞髓系分化中相關(guān)基因組蛋白修飾特征的研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文造血干細(xì)胞髓系分化中相關(guān)基因組蛋白修飾特征的研究姓名：唐華容申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：陳方平20090501博士學(xué)位論文 中文摘要第一部分臍帶血來源的C D 3 4 + C D 3 8 ’細(xì)胞的體外純化和向各系的誘導(dǎo)分化目的：建立一個可行的從臍帶血中分選出C D 3 4 + C D 3 8 ‘細(xì)胞的方法，并在體外摸索出有效的粒系、紅系和巨核系的分化體系，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供可靠的細(xì)胞標(biāo)本。方法：①采用免疫磁珠

2、分選法( m a g n e t i c a c t i v a t e d c e l l s o r t i n g ,M A C S ) 正性分選出C D 3 4 + 細(xì)胞，再通過二次負(fù)性分選選出C D 3 4 + C D 3 8 ‘的細(xì)胞并用流式細(xì)胞術(shù)檢測其純度和用臺盼藍(lán)拒染法檢測細(xì)胞活率。②在體外應(yīng)用S C F + I L ．3 + G —C S F 或E P O 或T P O 細(xì)胞因子的組合分別誘導(dǎo)C D 3 4 + C D

3、 3 8 ‘的細(xì)胞向粒系、紅系以及巨核系分化。用細(xì)胞計數(shù)法繪制其各系細(xì)胞的增殖曲線及用流式細(xì)胞術(shù)檢測誘導(dǎo)分化的效率。結(jié)果：①用抗C D 3 4 磁珠第一次分選C D 3 4 + 細(xì)胞后，C D 3 4 + 細(xì)胞的純度可達(dá)9 5 ．2 4 + 1 ．0 3 ％：第二次分選后，C D 3 4 + ／C D 3 8 ’細(xì)胞的純度為9 0 ．2 3 4 - 2 ．5 2 ％。分選前后細(xì)胞活力為均可達(dá)9 9 ％以上。②體外誘導(dǎo)分化1 4 天時，粒

4、系細(xì)胞數(shù)增加了1 1 8 6 ．6 7 i ：1 0 6 ．1 倍，紅系細(xì)胞數(shù)增加了8 9 4 ．6 7 + 4 8 ．2 2 倍，巨核系細(xì)胞數(shù)增加了6 2 7 + 4 9 ．6 5 倍。③流式細(xì)胞術(shù)檢測的結(jié)果表明，在誘導(dǎo)分化的第1 4 天，C D l 5 + 細(xì)胞的比率為9 1 ．4 9 ％，C D 2 3 5 a + 細(xì)胞的比率為9 5 ．5 5 ％，C D 4 1 a + 細(xì)胞的比率為8 6 ．5 2 ％。結(jié)論：我們建立了有效的M