2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩57頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、背景:
  研究表明椎間盤退行性變(intervertebral disc degeneration,IDD)是臨床上引起腰腿痛以及脊柱生物力學(xué)改變及功能異常的根本因素。目前IDD的主要治療方法為保守治療和IDD末期手術(shù)摘除椎間盤,或行椎體間融合以改善臨床癥狀,但無法逆轉(zhuǎn)椎間盤退行性變的進(jìn)程。椎間盤退行性變的基因治療的研究在近幾年才逐漸興起,但基因治療因其潛在的長(zhǎng)期療效而迅速發(fā)展。髓核細(xì)胞衰老時(shí)蛋白多糖和水分大量丟失,纖維組織增生

2、、纖維環(huán)剝脫、椎體間隙狹窄和椎間盤生物力學(xué)改變。人源NDRG2近年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)在多數(shù)腫瘤組織中表達(dá)降低的新基因,隨著對(duì)其功能的深入研究,發(fā)現(xiàn)NDRG2不僅參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,而且也參與了多種細(xì)胞的增殖、分化的調(diào)控。因此,我們推測(cè)髓核細(xì)胞增殖、衰老的調(diào)控可能有NDRG2的參與,可能通過某種分子機(jī)制或通路在椎間盤退行性變中起到重要作用。
  目的:
  本實(shí)驗(yàn)通過慢病毒在髓核細(xì)胞系過表達(dá)NDRG2,觀察其對(duì)人髓核細(xì)胞衰老的影響,

3、進(jìn)而探討NDRG2在椎間盤退變中的作用。
  方法:
  1.人髓核細(xì)胞(NP cells)的培養(yǎng);
  2.利用慢病毒來構(gòu)建過表達(dá)NDRG2的載體,并感染人髓核細(xì)胞;
  3.Real-time PCR檢測(cè)髓核細(xì)胞中NDRG2的mRNA表達(dá)
  4.蛋白印跡實(shí)驗(yàn)(WB)檢測(cè)過表達(dá)NDRG2后人髓核細(xì)胞中表達(dá)NDRG2蛋白的情況;
  5.利用腺病毒載體外源性過表達(dá)P53對(duì)NDRG2蛋白表達(dá)水平的影響

4、,蛋白印跡實(shí)驗(yàn)(WB)檢測(cè)過表達(dá)P53后人髓核細(xì)胞中NDRG2蛋白的表達(dá)情況;
  6.MTT檢測(cè)髓核細(xì)胞生長(zhǎng)曲線分析過表達(dá)NDRG2髓核細(xì)胞的增殖情況;
  7.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)來測(cè)定分析過表達(dá)NDRG2后的周期變化;
  8.SA-β-gal染色檢測(cè)過表達(dá)NDRG2后髓核細(xì)胞的衰老變化情況;
  結(jié)果:
  1.在熒光倒置顯微鏡下觀察過表達(dá)NDRG2慢病毒感染48h后成功感染的細(xì)胞熒光為紅色,感染效率在9

5、5%以上;
  2.Real-time PCR檢測(cè)三組細(xì)胞,Lenti-NDRG2組髓核細(xì)胞較其他兩組NDRG2的mRNA的表達(dá)均明顯增加(P<0.05);
  3.感染72h后Western blot檢測(cè)示NDRG2表達(dá)明顯升高;
  4.蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)P53基因后NDRG2蛋白的表達(dá)隨著P53的升高而增加;
  5.過表達(dá)NDRG2組SA-β-gal染色陽性率較陰性對(duì)照組及正常組顯著增高;
  

6、6.MTT檢測(cè)髓核細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線分析過表達(dá)NDRG2后髓核細(xì)胞的增殖速度較陰性對(duì)照組及正常組降低;
  7.流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定過表達(dá)NDRG2組髓核細(xì)胞G0/G1期百分比較陰性對(duì)照組及正常組顯著增高,S期降低;
  8.SA-β-gal染色檢測(cè)過表達(dá)NDRG2組染色陽性率較陰性對(duì)照組及正常組顯著增高;
  結(jié)論:
  通過實(shí)驗(yàn)我們可以看到過表達(dá)NDRG2后髓核細(xì)胞的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)和細(xì)胞增殖受到抑制,衰老染色率增高。同時(shí)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論