長(zhǎng)期聯(lián)合應(yīng)用小劑量FK506和氯化鋰對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)端側(cè)吻合后神經(jīng)再生作用的觀察.pdf

1、目的：
　　1.探討FK506和氯化鋰促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后再生的效果及機(jī)制；
　　2.比較使用 FK506和氯化鋰在修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)損傷的可行性及優(yōu)越性；
　　3.探討不同劑量 FK506和氯化鋰對(duì)坐骨神經(jīng)損傷后修復(fù)和再生的影響及功能恢復(fù)的評(píng)價(jià)，為臨床治療周圍神經(jīng)損傷奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　成年SD大鼠49只，在接受端側(cè)吻合術(shù)后被隨機(jī)分配到7個(gè)不同的組中：A組，7只大鼠均接受腹腔注射0.9％生理鹽水1

2、mg/kg/d；B組，7只大鼠均接受腹腔注射FK5061mg/kg/d;C組，7只大鼠均接受腹腔注射FK5060.5mg/kg/d;D組，7只大鼠均接受腹腔注射氯化鋰85mg/kg/d；E組，7只大鼠均接受腹腔注射氯化鋰40mg/kg/d；F組，7只大鼠均接受腹腔注射氯化鋰40mg/kg/d和FK5060.5mg/kg/d；G組，7只大鼠均接受腹腔注射氯化鋰85mg/kg/d和FK5061mg/kg/d；手術(shù)后,每天對(duì)大鼠進(jìn)行腹腔內(nèi)注射

3、,共12周。術(shù)后大體觀察實(shí)驗(yàn)大鼠手術(shù)切口、肢體腫脹、肢端潰瘍形成及肢體恢復(fù)自主運(yùn)動(dòng)情況；分別2周、4周、6周、8周和12周進(jìn)行功能學(xué)檢查和分析。術(shù)后12周測(cè)量趾長(zhǎng)伸肌濕重比值、檢測(cè)神經(jīng)電生理、免疫組織化學(xué)指標(biāo)以觀察評(píng)價(jià)神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的情況。
　　結(jié)果：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量及大體觀察實(shí)驗(yàn)選用大鼠49只，高劑量聯(lián)合應(yīng)用FK506和氯化鋰組有2只因免疫抑制劑影響導(dǎo)致死亡，有47只模型進(jìn)入到最終分析。所有大鼠術(shù)后切口均順利愈合

4、，無(wú)死亡和感染。少量大鼠見(jiàn)足底潰瘍，均在兩周內(nèi)愈合。術(shù)后早期所有大鼠后肢運(yùn)動(dòng)笨拙，膝關(guān)節(jié)屈曲障礙。術(shù)后第 l2周處死前觀察，各使用藥物治療組大鼠的術(shù)側(cè)膝關(guān)節(jié)手術(shù)后屈曲障礙得到了改善明顯，針刺反應(yīng)靈敏。而對(duì)照組改善較差，針刺反應(yīng)較遲鈍。術(shù)前的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異，然而應(yīng)用藥物治療后實(shí)驗(yàn)組B組、C組、F組、G組動(dòng)物體重明顯低于對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），其中D組LiCl85mg/kg/d和E組LiCl40mg/kg/d與

5、對(duì)照組0.9%生理鹽水1mg/kg/d之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（見(jiàn)圖5）
　　2.足印分析結(jié)果術(shù)后第2,4,6,8,10,12周時(shí)進(jìn)行大鼠坐骨神經(jīng)指數(shù)測(cè)量并比較：在各組中，正常步態(tài)的足印(左側(cè)顯示為后爪各趾充分伸展)，而術(shù)側(cè)(右側(cè)則顯示為后爪“足下垂”且屈曲攣縮，各趾內(nèi)收)。術(shù)后12周時(shí)，6個(gè)藥物治療組SFI與對(duì)照組間比較差異有顯著性意義(P<0.05)，但是各實(shí)驗(yàn)組之間SFI無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（見(jiàn)表1）

6、
　　3.趾長(zhǎng)伸肌肌濕重質(zhì)量術(shù)后12周處死大鼠后切取趾長(zhǎng)伸肌，在分析天平上稱出肌肉的濕重并觀察小腿肌肉萎縮情況,并按照如下公式計(jì)算:實(shí)驗(yàn)側(cè)肌肉濕重與正常側(cè)的百分比=實(shí)驗(yàn)側(cè)肌肉重量/對(duì)側(cè)肌肉重量。A組與各實(shí)驗(yàn)組間的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組中B組和F組間差異無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但均優(yōu)于其他實(shí)驗(yàn)組（P<0.05）。（見(jiàn)表2）
　　4.免疫組織化學(xué)檢測(cè)術(shù)后12周，藥物治療組可見(jiàn)大量再生有髓神經(jīng)纖維和

7、無(wú)髓纖維混合，雪旺細(xì)胞形態(tài)正常，包繞再生軸突形成有髓纖維，大多數(shù)髓鞘結(jié)構(gòu)發(fā)育良好，呈同心圓板層樣結(jié)構(gòu)，少數(shù)為未完全閉合的不成熟髓鞘。對(duì)照組，可以觀察到再生的神經(jīng)纖維稀疏，髓鞘發(fā)育不良。S100及NF染色，藥物治療組要優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)，但是各個(gè)藥物之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（見(jiàn)表3，圖3,圖4）
　　5.神經(jīng)電生理檢測(cè)藥物治療組大鼠的神經(jīng)傳導(dǎo)速度上均優(yōu)于空白對(duì)照組，對(duì)照組的神經(jīng)傳導(dǎo)速度第6周和第12周的數(shù)據(jù)上并無(wú)好

8、轉(zhuǎn)傾向（P>0.05），藥物治療組間兩兩比較后12周的數(shù)據(jù)上均明顯優(yōu)于第6周的數(shù)據(jù)(P<0.05)。（見(jiàn)表4）
　　結(jié)論：
　　1.FK506和氯化鋰對(duì)坐骨神經(jīng)損傷的再生都具有明顯的促進(jìn)作用。
　　2.長(zhǎng)期小劑量聯(lián)合應(yīng)用FK506和氯化鋰處理后可在短時(shí)間內(nèi)降低周圍神經(jīng)損傷后發(fā)生的免疫排斥反應(yīng)，從而迅速改善坐骨神經(jīng)損傷后再生的微環(huán)境，以利于神經(jīng)再生速度和質(zhì)量的提高，取得了與高劑量聯(lián)合用藥組同樣的治療效果，卻并沒(méi)有發(fā)生致命