聯(lián)合應(yīng)用IGF-1與bFGF對大鼠坐骨神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景以及目的：
　　 周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)是醫(yī)學(xué)上的難題之一。目前自體神經(jīng)移植是治療周圍神經(jīng)缺損的金標(biāo)準(zhǔn)，但仍存在供體缺乏、供體神經(jīng)支配區(qū)功能障礙等缺陷。因此替代自體神經(jīng)的載體成為現(xiàn)階段研究的熱點(diǎn)。甲殼素導(dǎo)管及其衍生物具有加速血管再生、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞生長、減少瘢痕形成等優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)已成為替代自體神經(jīng)可靠的載體。但單獨(dú)應(yīng)用甲殼素導(dǎo)管仍有局限性，它不能有效促進(jìn)雪旺式細(xì)胞的分化及再生。胰島素樣生長因子(IGF-1)和堿性成纖維樣生長因子(bF

2、GF)不但能保護(hù)神經(jīng)元并為神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育提供營養(yǎng)，而且能促進(jìn)雪旺細(xì)胞增殖，從而起到促進(jìn)神經(jīng)再生的作用。因此對周圍神經(jīng)損傷的修復(fù)有一定作用。但以甲殼素導(dǎo)管為載體，聯(lián)合應(yīng)用胰島素樣生長因子(IGF-1)和堿性成纖維樣生長因子(bFGF)修復(fù)周圍神經(jīng)的研究尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)探討聯(lián)合應(yīng)用IGF-1與bFGF對大鼠坐骨神經(jīng)再生功能的影響，從而為探索治療周圍神經(jīng)損傷新方法提供依據(jù)。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：
　　 健康雄性SD大鼠80只，隨機(jī)

3、分為5組，每組16只，制備雙側(cè)大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型（神經(jīng)缺損10mm），以可吸收甲殼素神經(jīng)導(dǎo)管橋接神經(jīng)兩斷端形成神經(jīng)再生室。A組為空白對照組組:神經(jīng)再生室內(nèi)注入等滲生理鹽水20μL,B組為對照組:神經(jīng)再生室內(nèi)注入明膠溶液20μL;C組為實(shí)驗(yàn)組:神經(jīng)再生室內(nèi)注入IGF-1凝膠20μL;D組為實(shí)驗(yàn)組:神經(jīng)再生室內(nèi)注入bFGF凝膠20μL;E組為實(shí)驗(yàn)組（聯(lián)合用藥組）:神經(jīng)再生室內(nèi)注入IGF-1+bFGF凝膠20μL。術(shù)后4周、8周收集標(biāo)本并觀

4、察再生神經(jīng)的大體形態(tài)，檢測神經(jīng)傳導(dǎo)速度，并進(jìn)行特殊染色，S-100免疫組化檢測，使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1.4周后，肉眼可見各組神經(jīng)缺損處已被新生組織填充，表面被大量的纖維組織包繞并有新生毛細(xì)血管，甲殼素導(dǎo)管內(nèi)均有新生的組織，甲殼素導(dǎo)管未被完全吸收。8周后，肉眼觀可見神經(jīng)缺損處纖維組織明顯減少，大量新生毛細(xì)血管，甲殼素導(dǎo)管基本被吸收并見其少量崩解碎片。
　　 2.神經(jīng)

5、電生理檢測結(jié)果示:實(shí)驗(yàn)組E組再生神經(jīng)的傳導(dǎo)速度(4周:22.469±0.713，8周:28.095±1.163)優(yōu)于對照組(4周:11.418±0.519;8周:12.130±0.494)、空白對照組（4周:11.455±0.530;8周:11.936±0.755）、實(shí)驗(yàn)組C組(4周:16.009±0.680，8周:22.097±0.673)、實(shí)驗(yàn)組D組（4周:16.083±1.019，8周:22.618±0.863）。實(shí)驗(yàn)組E組的再生

6、神經(jīng)傳導(dǎo)速度明顯優(yōu)于其他各組，實(shí)驗(yàn)組C組和D組再生神經(jīng)傳導(dǎo)速度分別優(yōu)于對照組A組和空白對照組B組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，對照組A組與空白對照組B組的再生神經(jīng)傳導(dǎo)速度差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)組C組和D組的再生神經(jīng)傳導(dǎo)速度差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義組間比較結(jié)果顯示(P＞0.0167)(組間多重比較行Bonferroni法檢驗(yàn)，取校正=0.0167)。
　　 3.Loyez氏神經(jīng)染色法（特殊染色）結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組E組再生神經(jīng)纖維數(shù)(

7、4周:22.469±0.713，8周:28.095±1.163)優(yōu)于對照組B組(4周:11.418±0.519;8周:12.130±0.494)、空白對照組A組(4周:11.455±0.530;8周:11.936±0.755)、實(shí)驗(yàn)組C組（4周:16.009±0.680，8周:22.097±0.673）、實(shí)驗(yàn)組D組（4周:16.083±1.019，8周:22.618±0.863）。實(shí)驗(yàn)組E組的再生神經(jīng)纖維數(shù)的平均值明顯高于其他各組，實(shí)驗(yàn)

8、組C組與D組再生神經(jīng)纖維數(shù)的平均值分別優(yōu)于對照組A組和空白對照組B組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，對照組A組與空白對照組B組的再生神經(jīng)纖維數(shù)的平均值差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)組C組和D組的再生神經(jīng)纖維陽性細(xì)胞數(shù)的平均值差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義組間比較結(jié)果顯示(P＞0.0167)(組間多重比較行Bonferroni法檢驗(yàn)，取校正=0.0167)。
　　 4.S-100免疫組化數(shù)據(jù)結(jié)果示:實(shí)驗(yàn)組E組再生神經(jīng)纖維陽性細(xì)胞數(shù)(4周:22.4

9、69±0.713，8周:28.095±1.163)優(yōu)于對照組B組（4周:11.418±0.519;8周:12.130±0.494）、空白對照組A組(4周:11.455±0.530;8周:11.936±0.755)、實(shí)驗(yàn)組C組（4周:16.009±0.680，8周:22.097±0.673）、實(shí)驗(yàn)組D組（4周:16.083±1.019，8周:22.618±0.863）。實(shí)驗(yàn)組E組的再生神經(jīng)纖維陽性細(xì)胞數(shù)的平均值明顯高于其他各組，實(shí)驗(yàn)組C組

10、和D組再生神經(jīng)纖維陽性細(xì)胞數(shù)的平均值分別優(yōu)于對照組A組和空白對照組B組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，對照組A組與空白對照組B組的再生神經(jīng)纖維陽性細(xì)胞數(shù)的平均值差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)組C組和D組的再生神經(jīng)纖維陽性細(xì)胞數(shù)的平均值差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義組間比較結(jié)果顯示(P＞0.0167)(組間多重比較行Bonferroni法檢驗(yàn)，取校正=0.0167)。
　　 結(jié)論：
　　 1.甲殼素導(dǎo)管中注入IGF-1凝膠能促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性神經(jīng)