IL-17及其受體在人腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)的研究.pdf

1、目的:檢測(cè)白細(xì)胞介素17(Interleukin-17,IL-17)及白細(xì)胞介素17受體(Interleukin-17 receptor,IL-17R)在不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織及患者外周血中表達(dá)的情況,并探討其與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的關(guān)系。
　　方法:(1)病例分組:收集病理確診的31例膠質(zhì)瘤組織I級(jí)2例、I I級(jí)10例、III級(jí)9例和IV級(jí)10例為實(shí)驗(yàn)組,并將WHOI、I I級(jí)合并為低級(jí)別組(12例),W H O III、IV級(jí)高級(jí)別組(

2、19例);以顱腦外傷減壓術(shù)切除的失活腦組織10例為對(duì)照組;同時(shí),31例膠質(zhì)瘤患者及10例顱腦外傷患者采集靜脈血標(biāo)本備用,并以10例健康志愿者外周血為對(duì)照組。(2)采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)高級(jí)別膠質(zhì)瘤、低級(jí)別膠質(zhì)瘤組織及其對(duì)照組中IL-17及 IL-17 R進(jìn)行染色并檢測(cè)其表達(dá)情況,研究其與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的關(guān)系。(3)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-timePCR)的方法檢測(cè)IL-17mRNA及 IL-17RmRNA在不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織、

3、患者外周血及其對(duì)照組中的表達(dá)情況,研究其與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的關(guān)系。(4)采用蛋白質(zhì)免疫印記法(Western blot)檢測(cè)IL-17及 IL-17R在不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織、患者外周血及其對(duì)照組中蛋白質(zhì)水平的表達(dá)情況,研究其與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的關(guān)系。
　　結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)結(jié)果,IL-17在減壓腦組織、低級(jí)別及高級(jí)別膠質(zhì)瘤中均有陽性表達(dá),其陽性率分別為30％、67%、100%,平均秩次分別為16.84、31.31、45.4

4、3,經(jīng)各組間兩兩比較進(jìn)行秩和檢驗(yàn),其表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H c=24.63,P<0.05); IL-17R在減壓腦組織、低級(jí)別及高級(jí)別膠質(zhì)瘤中存在陽性表達(dá),其陽性率分別為50%、83%、100%,平均秩次分別為18.42、35.73、49.65,經(jīng)各組間兩兩比較進(jìn)行秩和檢驗(yàn),其表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H c=28.42,P<0.05)。(2) RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)果,IL-17mRNA在對(duì)照組減壓腦組織、低級(jí)別及高級(jí)別組膠質(zhì)瘤組織

5、中表達(dá)的灰度值分別為31.62±1.95、85.79±4.58、134.77±6.32, IL-17RmRNA表達(dá)為76.20±3.97、137.66±64、193.82±6.20,經(jīng)方差分析(F=221.04,尸<0.05),且組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(^<0.05)。IL-17mRNA在對(duì)照組健康患者外周血、外傷減壓患者外周血、低級(jí)別及高級(jí)別組膠質(zhì)瘤患者外周血中表達(dá)的灰度值分別為42.09±1.65、48.21±1.79、103.71

6、±4.37、184.67±6.51,IL-17RmRNA表達(dá)為83.18±4.57、89.47±3.82、158.45±5.34、237.32±7.29,經(jīng)方差分析(F=274.64,p<0.05),對(duì)照組與減壓組比較(t=-0.92,p>0.05),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,余組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。(3) Western b lo t方法檢測(cè)結(jié)果,IL-17 m R N A在對(duì)照組減壓腦組織、低級(jí)別及高級(jí)別組膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)

7、的灰度值分別為0.23±0.01、0.42±0.01、0.67±0.02, IL-17 R m R N A表達(dá)為0.34±0.01、0.68±0.02、0.89±0.03,經(jīng)方差分析(F=89.23,p<0.05),且組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。IL-17蛋白質(zhì)在對(duì)照組健康患者外周血、外傷減壓患者外周血、低級(jí)別及高級(jí)別組膠質(zhì)瘤患者外周血中表達(dá)的灰度值分別為0.33±0.01、0.35±0.01、0.5牡0.02、0.85±0

8、.02,IL-17R蛋白質(zhì)的表達(dá)為0.42±0.01、0.43±0.01、0.78±0.02、0.94±0.03,經(jīng)方差分析(F=107.89,^<0.05),對(duì)照組與減壓組比較(t=-0.83,p0.05),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,余組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。(4) IL-17在相同膠質(zhì)瘤患者外周血及相對(duì)應(yīng)的膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)明顯正相關(guān)(r=0.520,pVV=0.003), IL-17 R在相同膠質(zhì)瘤患者外周血及相對(duì)應(yīng)的膠質(zhì)