纖維黏連蛋白通過mTOR信號(hào)通路激活而促進(jìn)膽囊癌細(xì)胞的增殖和侵襲.pdf

1、第一部分、膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平與患者預(yù)后相關(guān)性的研究
　　目的：探討膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平與患者臨床病理因素及預(yù)后的相關(guān)性。
　　方法：通過免疫組織化學(xué)染色的方法檢測(cè)116例膽囊癌和35例慢性膽囊炎石蠟組織樣本中FN的表達(dá)水平。分析膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平與臨床病理因素之間的相關(guān)性。采用Kaplan-meier單因素生存分析和Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法研究FN的表達(dá)水平與膽囊癌患者預(yù)后之間的相關(guān)性。

2、>　　結(jié)果：膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平較慢性膽囊炎顯著升高。膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平與腫瘤分期和病理分級(jí)顯著相關(guān)。FN高表達(dá)的膽囊癌患者術(shù)后中位生存時(shí)間顯著低于FN低表達(dá)的膽囊癌患者。膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平是影響膽囊癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　結(jié)論：膽囊癌組織中FN的表達(dá)水平與腫瘤分期、病理分級(jí)和患者的預(yù)后顯著相關(guān)。
　　第二部分、外源性FN對(duì)膽囊癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
　　目的：研究外源性FN對(duì)膽囊癌細(xì)

3、胞增殖和侵襲的作用。
　　方法：在體外細(xì)胞培養(yǎng)中，通過MTS細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞周期分析、劃痕遷移實(shí)驗(yàn)、transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和明膠酶譜實(shí)驗(yàn)檢測(cè)外源性FN對(duì)膽囊癌細(xì)胞GBC-SD和NOZ增殖和侵襲能力的影響。在裸鼠膽囊癌細(xì)胞NOZ皮下移植瘤和尾靜脈-肺轉(zhuǎn)移模型中，進(jìn)一步研究外源性 FN對(duì)膽囊癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：外源性FN以劑量依賴性方式促進(jìn)了膽囊癌細(xì)胞GBC-SD和NOZ的增殖、遷移、

4、侵襲和活性MMP-9的分泌。外源性FN處理后的NOZ細(xì)胞皮下移植瘤生長(zhǎng)速度顯著增快，肺轉(zhuǎn)移數(shù)目顯著增多。
　　結(jié)論：外源性FN可促進(jìn)膽囊癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力。
　　第三部分、FN促進(jìn)膽囊癌增殖和侵襲的機(jī)制研究
　　目的：研究FN促進(jìn)膽囊癌增殖和侵襲的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　方法：Western blot檢測(cè)在FN處理后的膽囊癌細(xì)胞GBC-SD和NOZ中，mTOR信號(hào)通路上關(guān)鍵激酶的活化狀態(tài)。統(tǒng)計(jì)分析膽囊癌組織中F

5、N的表達(dá)水平和4E-BP1磷酸化水平的相關(guān)性。采用MTS細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)、transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和明膠酶譜實(shí)驗(yàn)觀察雷帕霉素對(duì)FN誘導(dǎo)的膽囊癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：外源性FN處理后的膽囊癌細(xì)胞中FAK、Akt、mTOR和4E-BP1磷酸化水平顯著升高。在膽囊癌組織中，F(xiàn)N的表達(dá)水平與4E-BP1磷酸化狀態(tài)成正相關(guān)。雷帕霉素可部分阻斷FN對(duì)膽囊癌細(xì)胞增殖和侵襲的促進(jìn)作用。
　　結(jié)論：Akt/mTOR/4E-BP1