全反式維甲酸對(duì)ANGⅡ誘導(dǎo)的大鼠心臟成纖維細(xì)胞增殖及膠原蛋白分泌的影響和機(jī)制的研究.pdf

1、血流動(dòng)力學(xué)的超負(fù)荷可以改變心臟與血管的結(jié)構(gòu)及成份。這種反應(yīng)通常被認(rèn)為是正常的適應(yīng)性和防御性反應(yīng)，可以降低室壁和血管壁的壓力，從而維持心臟的正常功能。但是在病理?xiàng)l件下，這種反應(yīng)可能也會(huì)引起心肌的僵硬和心室舒張功能的降低，最終形成心肌重構(gòu)，導(dǎo)致慢性心衰。這是心臟病發(fā)病率及心臟病人死亡率升高的重要高危因素之一。心肌重構(gòu)是多種因素的綜合效應(yīng)，包括機(jī)械牽張、缺血、激素、肽類(lèi)血管活性物質(zhì)等。血管緊張素II(AngiotensinII，ANGII)是

2、腎素一血管緊張素系統(tǒng)中的主要活性物質(zhì)，大量的研究顯示，ANGII在心肌肥大，重構(gòu)及心衰的過(guò)程中是一個(gè)重要的體液因子。ANGII主要是通過(guò)AT1受體途徑促進(jìn)細(xì)胞增殖，合成及分泌等，而在調(diào)節(jié)膠原蛋白代謝的途徑中，主要有MAPK途徑、TGF—B1/SMAD途徑和PLCβ／PKC途徑參與。 在心肌重構(gòu)的過(guò)程中，心肌成纖維細(xì)胞主要發(fā)生以下三種重要的但沒(méi)有必然聯(lián)系的改變：1)表達(dá)平滑肌Q肌動(dòng)蛋白并含有收縮性粗纖維，呈現(xiàn)肌纖維樣細(xì)胞的特征；2

3、)細(xì)胞大量增殖；3)分泌大量細(xì)胞間質(zhì)，包括纖維粘連素、層粘連蛋白、及膠原蛋白I和III堆積在組織間隙和血管周?chē)Ｓ捎诶w維性物質(zhì)的堆積(所謂的“反應(yīng)性纖維化”)，可改變組織間質(zhì)的結(jié)構(gòu)及心肌細(xì)胞與周?chē)⊙艿南嗷ヂ?lián)系，影響心肌的收縮性。已有研究表明，在體外培養(yǎng)的新生大鼠心臟成纖維細(xì)胞中，ANGII可以誘導(dǎo)心臟成纖維細(xì)胞的增殖并促使其大量分泌膠原蛋白等纖維性物質(zhì)。因此ANGII在心肌纖維化的發(fā)生中起重要的作用，而減少或抑制ANGII效應(yīng)的藥物

4、必然對(duì)緩解心肌重構(gòu)、心肌纖維化及心衰具有重要的意義。 全反式維甲酸(A11-transretinoicacid，atRA)是維生素A的衍生物，通過(guò)其相應(yīng)受體的介導(dǎo)，可以發(fā)揮多種生物學(xué)作用。我們的實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)證實(shí)，在自發(fā)性高血壓大鼠中慢性給予小劑量atRA可以抑制心臟小血管壁的增厚；同時(shí)在離體實(shí)驗(yàn)中atRA還可以抑制ANGII所誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞的“去分化”性改變和肥大。另有人報(bào)道，在動(dòng)脈粥樣硬化的動(dòng)物中，atRA可以促進(jìn)金屬蛋白酶的分

5、泌，從而緩解血管壁的纖維化。因此，我們推測(cè)atRA對(duì)ANGII所誘導(dǎo)的心臟成纖維細(xì)胞增殖及分泌的效應(yīng)可能也有一定的抑制作用。atRA是一種脂溶性小分子，有RAR和RXR兩種核內(nèi)受體，它們可以形成同源及異源二聚體起作用。RXR還可以與核內(nèi)受體超家族的其它成員如甲狀腺素受體和維生素D受體等相結(jié)合，形成異源二聚體而發(fā)揮廣泛的作用，因而也使atRA的作用復(fù)雜化。 心臟成纖維細(xì)胞和心肌細(xì)胞是心臟中主要的細(xì)胞類(lèi)型之一。成纖維細(xì)胞的增殖與膠原

6、蛋白的分泌在心肌重構(gòu)，特別是纖維化的形成，起重要的作用。本實(shí)驗(yàn)選用無(wú)血清培養(yǎng)的心臟成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，觀察了ANGII和atRA對(duì)心臟成纖維細(xì)胞的增殖，細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄因子．β1(TGF—β1)的含量及分泌I型和III型對(duì)膠原蛋白的影響。 實(shí)驗(yàn)中觀察到：1)atRA(10～一lO5mol／L)可以明顯地抑制ANGII誘導(dǎo)的心臟成纖維細(xì)胞的增殖，這種抑制效應(yīng)呈劑量依賴(lài)性；2)用ANGII(10-7moI／L)處理無(wú)血清培養(yǎng)的新生

7、大鼠的心臟成纖維細(xì)胞2天，可導(dǎo)致心肌成纖維細(xì)胞分泌到培養(yǎng)液中的膠原蛋白增多。ANGII的這一效應(yīng)可被AT1。受體拮抗劑洛沙坦(10-~mol／L)阻斷，但不能被AT2受體拮抗劑PDl23319阻斷；而應(yīng)用atRA(10．5mol／L)處理心臟成纖維細(xì)胞，可以明顯抑制ANGII誘導(dǎo)的I型和III型膠原蛋白分泌的增加；3)ANGII可以促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子一βl在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，atRA(10．5mol／L)則可以完全抑制甚至消除ANGII的這種