蠟梅科植物基因組大小預(yù)測(cè)與核型分析.pdf

1、蠟梅科(Calycanthaceae)植物屬于被子植物門(Angiospermae)雙子葉植物綱（Dicotyledoneae）原始花被亞綱(Archichlamydeae)毛茛目(Ranales)，包含多種著名的觀賞植物。特別是該科植物——蠟梅（Chimonanthus praecox），因其在寒冷少花的冬季綻放而格外著名。到目前為止，有關(guān)基因組大小方面的研究尚未公開(kāi)報(bào)道。因此，本文利用流式細(xì)胞術(shù)預(yù)測(cè)蠟梅科基因組大小，為該科基因組學(xué)方

2、面的研究提供參考數(shù)據(jù)。同時(shí)，本文采用Photoshop圖像處理軟件，分析蠟梅科染色體核型，為探討該科物種的親緣關(guān)系提供新的細(xì)胞學(xué)證據(jù)。主要結(jié)論如下:
　　1、蠟梅科細(xì)胞核懸浮液制備體系
　　通過(guò)設(shè)置Tris·MgCl2、WPB、LB01和Partec商用解離液共4種裂解液，以及不同的實(shí)驗(yàn)材料、裂解液處理時(shí)間、內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法的選擇和染色時(shí)間等影響因素的探索實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用新鮮幼嫩葉片做實(shí)驗(yàn)材料，在解離液WPB中裂解3min，

3、使用50μg/ml的熒光染料DAPI低溫避光染色10min后上機(jī)檢測(cè)效果最好。該方法具有細(xì)胞碎片少、主峰清晰等優(yōu)點(diǎn)。
　　2、蠟梅科基因組大小測(cè)定
　　本實(shí)驗(yàn)以水稻‘日本晴’（Oryza sativa‘Nipponbare’）及大豆William82（Glycinemax‘William82’）為參照植物，首次將流式細(xì)胞儀用于蠟梅科物種的基因組大小測(cè)定中。測(cè)定結(jié)果表明:蠟梅（Chimonanthus praecox）、亮葉蠟

4、梅（Ch.nitens）、柳葉蠟梅（Ch.salicifolius）、西南蠟梅（Ch.campanulatus）、夏蠟梅（Calycanthus chinensis）、美國(guó)蠟梅（C.floridus）的基因組大小依次為805.88Mb、673.57Mb、873.58Mb、790.46Mb、838.38Mb、854.79Mb。
　　3、蠟梅科核型分析
　　通過(guò)使用0.002 mol/L8-羥基喹啉溶液預(yù)處理3.5h或者4.0h