煙酸對外周血單核細胞中cAMP與ABCA1表達的作用.pdf

1、目的:觀察煙酸和PKA抑制劑Ro31-8220單獨及聯(lián)合應(yīng)用對體外培養(yǎng)的單核細胞中cAMP及ABCA1表達的影響,探討煙酸調(diào)節(jié)ABCA1表達與cAMP/PKA途徑的相關(guān)性。
　　方法:選取病人,通過冠脈造影及血脂檢查分為三組:1.非冠心病人組(設(shè)為空白對照組);2.冠心病人高血脂組;3.冠心病人正常血脂組;其中2、3組均分別設(shè)有空白對照、煙酸、PKA抑制劑、煙酸+PKA抑制劑四個亞組。無菌采集病人股動脈血液標(biāo)本,分離外周血單核細胞

2、加以培養(yǎng),各組細胞均孵育3~48小時。選擇3、12、24和48小時等4個時間點,運用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和Western blot蛋白印跡法分別檢測ABCA1mRNA與ABCA1蛋白表達的變化,采用低pH值EIA法測定細胞內(nèi)cAMP含量的變化,探討煙酸對單核細胞中ABCA1與cAMP表達影響的相關(guān)性。
　　結(jié)果:①各組外周血單核細胞中ABCA1的表達及cAMP的含量,在3h~48h這一時間段前后無明顯變化(P>0.05);②冠心病高

3、血脂組患者單核細胞中ABCA1的表達較非冠心病人組單核細胞中ABCA1的表達明顯降低(P<0.05),而冠心病正常血脂組單核細胞中ABCA1的表達較非冠心病人組單核細胞中ABCA1的表達無明顯差異(P>0.05);③煙酸單獨作用能明顯增加冠心病人高血脂組及冠心病人正常血脂組單核細胞中ABCA1的表達(P<0.05),同時使這兩組單核細胞中cAMP的含量增加(P<0.05);④PKA抑制劑Ro31-8220單獨作用能明顯降低冠心病人高血脂

4、組及冠心病人正常血脂組單核細胞中ABCA1的表達(P<0.05),同時使這兩組單核細胞中cAMP的含量降低(P<0.05);⑤煙酸與PKA抑制劑聯(lián)合應(yīng)用時,煙酸使冠心病人高血脂組及冠心病人正常血脂組單核細胞中ABCA1表達上調(diào)及cAMP的含量增加的作用被完全抑制(P<0.05)。
　　結(jié)論:①煙酸及Ro31-8220對外周血單核細胞中ABCA1表達及cAMP含量的影響,與時間無明確相關(guān)性;煙酸藥物作用穩(wěn)定;②外周血單核細胞中ABC