氧化損傷性白內(nèi)障形成過程中基質(zhì)金屬蛋白酶—2和9的表達及意義.pdf

1、目的檢測氧化損傷性白內(nèi)障形成過程中隨著氧化損傷作用時間的延長晶狀體囊膜和晶狀體纖維中基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMP)～2和9活性和基因表達的動態(tài)變化，探討MMP一2和9在氧化損傷性白內(nèi)障形成過程中的作用及意義。 方法利用過氧化氫誘導(dǎo)離體新西蘭兔晶狀體出現(xiàn)氧化損傷性白內(nèi)障。無菌條件下利用顯微鏡從后路取出晶狀體，將晶狀體隨機分為兩組，對照組置于DMEM培養(yǎng)基中，H2O2組置于含有l(wèi)mmol／L

2、H202的DMEM培養(yǎng)基中，37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育，取6、12、24、48小時四個時間點停止孵育。取出晶狀體，在顯微鏡下分離出晶狀體囊膜(包括其下的晶狀體上皮細胞)和晶狀體纖維后，分別利用酶譜法分析其中blMP-2和一9活性變化，利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(盯一PCR)測定MMP一2和MMP一9的基因表達的變化。 結(jié)果H2O2組晶狀體在培養(yǎng)12小時后即出現(xiàn)混濁，24小時后出現(xiàn)了較明顯的混濁，培養(yǎng)48小時后混濁更加明顯，而對照組

3、晶狀體仍然保持透明。酶譜法表明對照組晶狀體囊膜中和晶狀體纖維中均未見MMP一2和9的存在；H202組晶狀體囊膜中存在MMP一2和MMP一9，而晶狀體纖維中僅見MMP-9，未見MMP一2的存在。實驗組中MMP-2和9的活性隨時間的延長均有增強，其中各時間點之間差異有顯著性的意義。盯一PCR法發(fā)現(xiàn)，對照組晶狀體囊膜和晶狀體纖維中亦未見MMP一2和MMP一9的表達；H202組晶狀體囊膜中b!MP一2和9均有表達，而晶狀體纖維中僅見btMP-9