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1、細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)是存在于細(xì)胞之間的動態(tài)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),不僅構(gòu)成細(xì)胞外的網(wǎng)架結(jié)構(gòu),而且對組織細(xì)胞的遷移、分化、增殖等生理過程和炎癥、新生血管等病理過程有重要作用?;|(zhì)金屬蛋白酶是一組能降解細(xì)胞外基質(zhì)成分的重要的內(nèi)源性蛋白分解酶,其在ECM中的產(chǎn)生和降解的動態(tài)平衡,在創(chuàng)傷修復(fù)和組織重建中有重要作用,其在組織纖維化中的作用近年來備受關(guān)注。晶體手術(shù)后,因晶體上皮細(xì)胞游走、遷移、分化,常不可避免地引發(fā)后發(fā)性白內(nèi)障,后發(fā)性白內(nèi)障的產(chǎn)生和發(fā)展可能與MM
2、Ps有關(guān),正常組織中的MMPs表達(dá)量極少,在兔眼晶體術(shù)后的房水MMPs動態(tài)變化研究中,MMP-2、MMP-9均有不同的變化。 目的: 本實驗通過對晶狀體手術(shù)后形成后發(fā)障過程中MMPs的水平進(jìn)行檢測,探討兔眼晶狀體皮質(zhì)吸出術(shù)后不同時期MMP-2、MMP-9的變化,推斷其在后發(fā)性白內(nèi)障形成過程中所起的作用。 方法: 選用中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物部提供的白色家兔42只,體重0.9~1.1kg,雌雄不限,隨機(jī)分成實驗
3、組(35只).及對照組(7只)。實驗組兔肌肉注射氯胺酮(15mg/kg體重)進(jìn)行麻醉,由專人行雙眼透明晶狀體皮質(zhì)吸出術(shù):3.2mm角鞏膜緣切口,前房注入粘彈劑,形5mm直徑的開罐式截囊,水分離囊下晶體皮質(zhì),注吸檔抽吸皮質(zhì),切口不縫合。術(shù)后1%阿托品眼膏散瞳雙眼,分別于術(shù)后一周、一個月、兩個月、三個月、五個月各處死7只兔;對照組不做處理直接處死。摘除眼球,剪除角膜、虹膜,斷晶體懸韌帶,取出晶體后立即將各組的2只兔的4只晶體用4%多聚甲醛固
4、定24小時,石蠟包埋;各組的另5只兔的10只晶體在顯微鏡下剝出晶狀體殘存的囊膜(包括5mm以外的前囊及全部后囊),稱濕重,置-70℃冷凍保存。石蠟標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)定位檢測MMP-2、MMP-9,冷凍標(biāo)本用ZymograPhy方法進(jìn)行MMP-2、MMP-9活性測定。 實驗結(jié)果: 1、兔眼后發(fā)性白內(nèi)障形成 術(shù)后不同時期裂隙燈下觀察:術(shù)后前3天前房內(nèi)炎癥反應(yīng)明顯,虹膜充血;術(shù)后1周可見前囊截緣出現(xiàn)白色環(huán)狀混濁,但后
5、囊尚透明;術(shù)后2周后囊呈薄紗狀;1個月出現(xiàn)線、條狀混濁,2~3個月成條索狀混濁,術(shù)后5個月后囊明顯混濁。 2、免疫組化結(jié)果 對照組晶體上皮細(xì)胞胞漿及細(xì)胞間質(zhì)中沒有明顯的MMP-2、MMP-9表達(dá),實驗組MMP-2于術(shù)后1~3個月表達(dá)增強(qiáng)。 3、Zymography凝膠檢查 對照組可檢測到極低的MMP-2、MMP-9活性(呈淡條帶);各實驗組MMP-2活性明顯強(qiáng)于對照組;MMP-9無明顯差異。 4、
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