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1、江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒BARF1基因表達(dá)對胃癌細(xì)胞系SGC7901生物學(xué)行為的影響姓名：李友瓊申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：周天戟20090605江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文ABSTRACTObjective：TostudytheeffectofBARFIgeneencodedbyEpsteinBan“virus0三Bv)ingastriccanoercelloncellbiologicalbehaviorSOastok
2、nowthefunctionofBARFlproteinandtheroleinEBVassociatedgastriccarcinoma(EBVaGC)Meth(xis：1)BARFIopenreadingframewasamplifiedbypolymerasechainreaction(PCR)basedontheDNAtempleteextractedfromEBVpositivecelllineB958andclonedint
3、opSG5eukaryoticexpressionvectorthroughpGEM—TcloningvectorandconfirmedbyrestrictionenzymesandDNAsequencing2)pSG5一BARFlandpSG5recurcontrolwereseparatelytransfectedintomoderatelydifferentiatedgastriccancercelllineSGC7901The
4、transfcctedcellswereclonedbylimiteddilutionandselectedbygeneficin(；418BARFlexprssionWasconfirmedbyRTPCR3)TheeffectofBARFloncellproliferationWascardedoutbycellcountingandblTrassayThefunctiononapoptosisinducedbyanti—cancer
5、drugdiamminedichloroplatinumpDP)waspreformedbycellcounting，Hoechst33342stainingandDNAladderassayinagargelelectrophoresisThecarcinogenicityWasdeterminedbysoft—agarcolonyformationassayandthecellmigrationabilitybytranswellm
6、igrationassayResults：1)pSG5BARFlwassuccessfullyconstructedandtransfectedintoSGC7901cellsandcellclonesstablyexpressingBARFlwereobtained2)Therewerehigherproliferationvelocities，highersurvivalrateandlowerapoptosisrateandles
7、sDNAladderafterinductionbyDDPhighercolonyformationrateinsoftagarandhighermigrationrateinBARFlexpressingclonescomparingtothecontr01Conclusion：OurresllltindicatedthatBARFlexpressioningastriccarcinomacellsledtomoreresistant
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