一株產(chǎn)石杉堿甲蛇足石杉內(nèi)生真菌的分離及其發(fā)酵條件的初步研究.pdf

1、蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.)Trev.)是一種多年生小型珍稀藥用蕨類植物，屬石杉科石杉屬(Huperzia)。石杉堿甲(Huperzine A，簡稱HupA)是首先從蛇足石杉中分離得到的一種生物堿，其對老年性癡呆、重癥肌無力和記憶力減退等疾病有很好的療效。迄今，HupA主要從蛇足石杉等石松植物中分離提取，但蛇足石杉等石松植物HupA含量低、生長緩慢，野生資源十分有限，且其人工栽培技術(shù)尚未突破，因此HupA生

2、產(chǎn)存在嚴重的原料短缺問題，必需尋找可替代的生產(chǎn)方式，否則蛇足石杉等石松植物資源將面臨生存的威脅。
　　 植物內(nèi)生真菌能產(chǎn)生大量新的天然產(chǎn)物，有些內(nèi)生真菌還可以產(chǎn)生與宿主植物相同或相近的代謝產(chǎn)物，已成為天然產(chǎn)物潛在的重要資源。據(jù)此，本文對產(chǎn)石杉堿甲蛇足石杉內(nèi)生真菌進行了分離和篩選，并對產(chǎn)石杉堿甲內(nèi)生真菌發(fā)酵條件進行初步研究，為利用內(nèi)生真菌發(fā)酵生產(chǎn)石杉堿甲奠定基礎(chǔ)。
　　 本研究從蛇足石杉根、莖、葉中共分離出內(nèi)生真菌56株，

3、其中乙酰膽堿酯酶抑制率達到70％以上的內(nèi)生真菌有14株，占分離內(nèi)生真菌總數(shù)的25％。菌株Slf14的抑制率最高，達到96.47％，因此對菌株Slf14菌種和產(chǎn)物鑒定及發(fā)酵條件進行了研究。通過形態(tài)學結(jié)合ITS和18SrDNA序列分析，菌株Slf14被歸屬為竹黃菌屬(Shiraia)，命名為Shiraia sp.Slf14。薄層層析、高效液相色譜、紫外掃描、質(zhì)譜以及核磁共振等實驗證明菌株Slf14可合成石杉堿甲。內(nèi)生真菌Sil14發(fā)酵條件的