粘著斑激酶(FAK)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及TNF-α誘導(dǎo)的凋亡的影響.pdf

1、上海醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文粘著斑激酶(FAK)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及TNF-α誘導(dǎo)的凋亡的影響姓名：方Y(jié)i申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)指導(dǎo)教師：查錫良20000501B 1 0 t 鑒定，獲得一株F A K 含量被抑制了一半的轉(zhuǎn)染株細(xì)胞A S - 7 7 2 1 。同時(shí)以p c D N A 3 空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染S M M C - 7 7 2 1 作為對(duì)照。接著，我們研究了抑制F A K 表達(dá)對(duì)S M M C - 7 7 2 1 細(xì)胞增殖的影響。與

2、對(duì)照p c - 7 7 2 1 相比，h S - 7 7 2 1 細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和軟瓊脂培養(yǎng)克隆形成能力都被明顯抑制。一另外流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期揭示，A s 一7 7 2 1細(xì)胞的s 期細(xì)胞減少了1 5 ％。這些說明在S M M C - 7 7 2 1 細(xì)胞中降低F A K含量能抑制細(xì)胞增殖，從而改善腫瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。降低F A K 含量也降低了細(xì)胞對(duì)胞外基質(zhì)的粘附能力。在1 ．2 5 9 9 ／m l 纖連蛋白時(shí)，A S -

3、 7 7 2 1 的粘附能力僅為對(duì)照的1 ／3 。同時(shí)，降低F A K 含量并未影響整合蛋白o(hù) ‘，p ，的蛋白水平，提示是F A K 低含量引起細(xì)胞粘附能力降低。以上結(jié)果表明用F A K 反義質(zhì)粒降低S M M C 一7 7 2 1 細(xì)胞的F A K 含量后可以抑制S M M C 一7 7 2 1 細(xì)胞的增殖，粘附能力。第二部分F A K 調(diào)節(jié)T N F - 伐和環(huán)己亞胺協(xié)同誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制的研究 。文獻(xiàn)報(bào)道F A K 參與調(diào)節(jié)多種

4、因素誘導(dǎo)的凋亡。如過表達(dá)持續(xù)激活的F A K 能保護(hù)M D C K 細(xì)胞免于失巢凋亡，抑制原癌基因c - m y c 誘導(dǎo)的凋亡。而目前對(duì)于F A K 在T N F - c t 誘導(dǎo)的凋亡中的作用并無報(bào)道。T N F —a 是一個(gè)具有多種功能的細(xì)胞因子。根據(jù)不同的細(xì)胞類型，T N F 一0 【可以產(chǎn)生諸如增殖，炎癥，凋亡的多種生物效應(yīng)。一些細(xì)胞對(duì)T N F - ( x 毒性敏感，而有些細(xì)胞則能拮抗T N F - c t 誘導(dǎo)的凋亡，而必

5、須用環(huán)己亞胺協(xié)同誘導(dǎo)。目前對(duì)于這部分細(xì)胞為什麼能拮抗T N F - c t 毒性的原因并不明確，而只有三種假設(shè)：1 ) T N F 一儀本身激活了某些抗凋亡信號(hào)，2 ) T N F 一Ⅸ刺激合成某些生存因子保護(hù)細(xì)胞免于凋亡，3 )T N F - ( x 誘導(dǎo)的凋亡信號(hào)尚不足以啟動(dòng)凋亡過程。最近的文獻(xiàn)報(bào)道T N F 一僅能夠激活P I 3 K - P K B ( A k t ) 信號(hào)通路從而拮抗其本身誘導(dǎo)的凋亡作用。P K B 是一絲／蘇