人類磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白在TRAIL誘導(dǎo)的卵巢癌凋亡中的作用.pdf

1、第一部分,hPEBP4干擾RNA載體的構(gòu)建、轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選和鑒定.目的:利用RNA干擾(RNAi)技術(shù),構(gòu)建hPEBP4的RNAi真核表達(dá)載體,然后轉(zhuǎn)染、篩選Caov-3細(xì)胞,并對篩選后細(xì)胞進(jìn)行鑒定.結(jié)論:利用RNAi技術(shù)構(gòu)建的干擾載體,從mRNA和蛋白質(zhì)水平上高效特異性地阻斷了目的基因hPEBP4的表達(dá),成為研究基因功能的有力工具,為進(jìn)一步深入探索基因功能奠定了良好的基礎(chǔ).第二部分,hPEBP4在TRAIL誘導(dǎo)的卵巢癌凋亡中的作用.目

2、的:觀察hPEBP4 RNA干擾與未干擾的Caov-3細(xì)胞對TRAIL誘導(dǎo)凋亡的反應(yīng)及細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的異同,初步判斷hPEBP4在TRAIL誘導(dǎo)的卵巢癌凋亡中的作用.結(jié)論:TRAIL能誘導(dǎo)調(diào)控hPEBP4的表達(dá),hPEBP4干擾后對TRAIL誘導(dǎo)凋亡的敏感性降低,可能與這一過程中p-ERK、p-MEK的激活和JNK、p38的活化減弱有關(guān),PD98059部分逆轉(zhuǎn)了干擾細(xì)胞對TRAIL的抵抗,表明hPEBP4可能在TRAIL誘導(dǎo)的凋亡中發(fā)揮

3、促凋亡作用,ERK活化可能參與了細(xì)胞抵抗凋亡,自我保護(hù)的分子機(jī)制.第三部分,hPEBP4與細(xì)胞內(nèi)信號分子的相互作用.目的:為進(jìn)一步驗(yàn)證hPEBP4促進(jìn)凋亡的功能,通過觀察hPEBP4與細(xì)胞內(nèi)信號分子的相互作用,深入探討hPEBP4發(fā)揮功能的分子機(jī)制.結(jié)論:hPEBP4在TRAIL誘導(dǎo)的凋亡中扮演著促凋亡的角色,這種作用的發(fā)揮是主要是通過抑制Raf/MEK/ERK通路,部分通過活化JNK、p38通路來實(shí)現(xiàn)的.hPEBP4可以作為TRAIL