油酰乙醇胺對(duì)非酒精性脂肪肝作用機(jī)制的研究.pdf

1、目 的：探討油酰乙醇胺（OEA）（過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-α的內(nèi)源性激動(dòng)劑）對(duì)非酒精性脂肪肝的作用及可能機(jī)制。
　　 方 法：以0.25mM 油酸造模 HepG2細(xì)胞24h，MTT法測(cè)定細(xì)胞活性，油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴儲(chǔ)積、測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中ALT/AST和細(xì)胞TG含量。給予OEA及陽(yáng)性對(duì)照藥非諾貝特干預(yù)4、8h，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)脂代謝相關(guān)基因的表達(dá)，同時(shí)觀察給藥12h后細(xì)胞內(nèi)脂滴蓄積情況,及細(xì)胞內(nèi)TG含量變化。

2、>　　 結(jié) 果：
　　 （1）0.25mM油酸造模24h對(duì)細(xì)胞活性無(wú)顯著影響，且油紅O染色顯示細(xì)胞內(nèi)有明顯紅色脂滴蓄積。與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞培養(yǎng)液中ALT未見(jiàn)有顯著性變化（P=0.18），AST含量明顯增高[（11.74±0.263）U/Lvs（13.29±0.4638）U/L，P<0.05），]細(xì)胞內(nèi)TG含量顯著升高[（1.258±0.1038）mg/dlvs（5.513±0.2612）mg/dl，P<0.001）。

3、r>　　 （2）造模成功后，予OEA及非諾貝特干預(yù)4、8h，實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示：該兩種藥物在4h時(shí)對(duì)LPL mRNA及SCD-1mRNA調(diào)控比較明顯，與對(duì)照組相比，50μM OEA處理組LPL mRNA表達(dá)明顯升高（0.00083±0.00044vs0.00409±0.00018，P＜0.001），而50μM非諾貝特組無(wú)明顯變化；50μM OEA及50μM非諾貝特處理組SCD-1mRNA表達(dá)均較對(duì)照組低（43.94±1.312、5

4、1.69±0.725vs62.62±2.085，P均<0.01）。該兩種藥物在8h對(duì)SREBP-1c mRNA及ACC mRNA調(diào)控比較明顯，與對(duì)照組相比，50μM OEA組SREBP-1c mRNA表達(dá)明顯降低（2.268±0.1487vs0.704±0.0747，P<0.001），而50μM非諾貝特對(duì)SREBP-1c基因表達(dá)無(wú)影響；50μM OEA及50μM非諾貝特處理組ACC mRNA表達(dá)均較對(duì)照組低（1.765±0.5009、3

5、.034±0.2839vs4.662±0.08452，P均<0.01）；
　　 （3）分別用10μM、50μM OEA及50μM 非諾貝特干預(yù)NAFLD細(xì)胞模型12h后，均可不同程度減少細(xì)胞內(nèi)蓄積的脂滴，其中50μM OEA效果最明顯。各處理組細(xì)胞內(nèi)TG含量較模型組均顯著下降：[（4.239±0.1273）mg/d、（3.343±0.2395）mg/dl、（3.467±0.244）mg/dlvs（5.181±0.2512）mg/