環(huán)境pH值對柑橘指狀青霉致病力的影響.pdf

1、柑橘果實在貯藏、運輸、銷售過程中，極易發(fā)生采后病害，而這些病害的發(fā)生往往會造成嚴重的經(jīng)濟損失。由指狀青霉(Penicillium digitatum)引起的綠霉病是眾多采后病害中最為嚴重的一種病害。受侵染的果實其發(fā)病部位周圍pH值會下降，隨著病果發(fā)病部位的pH降低，果實病斑擴張速率更快。本課題希望找出影響指狀青霉調(diào)控環(huán)境pH值的相關(guān)基因，可以為研發(fā)新的防治方法提供思路和理論依據(jù)。
　　該研究主要內(nèi)容是先通過活體實驗確認指狀青霉能否

2、使果實pH值降低，再通過實時熒光定量實驗判斷是哪個基因影響指狀青霉調(diào)控環(huán)境pH值。在確定目的基因之后，首先構(gòu)建重組質(zhì)粒，再根據(jù)同源重組原理對目的基因進行基因敲除，獲得指狀青霉突變體，對所獲得的突變體進行分子鑒定和表型鑒定。本課題主要研究結(jié)果如下:
　　1.發(fā)現(xiàn)指狀青霉病原菌能使培養(yǎng)基和活體果實的pH值都下降。
　　2.通過活體實驗發(fā)現(xiàn)指狀青霉在不同pH值的環(huán)境中其致病力有差異，尤其是在堿性的環(huán)境中，指狀青霉的致病力明顯弱于在

3、中性和酸性的環(huán)境中。
　　3.通過實時熒光定量，初步判斷palF基因可能與指狀青霉調(diào)控周圍環(huán)境的pH有關(guān)。
　　4.對指狀青霉palF基因的氨基酸序列進行保守結(jié)構(gòu)域分析，發(fā)現(xiàn)指狀青霉palF蛋白中存在Arrestin-C和Arrestin-N保守結(jié)構(gòu)域，推測palF基因參與環(huán)境pH感應信號轉(zhuǎn)導途徑中信號的傳遞。
　　環(huán)境pH值對柑橘指狀青霉致病力的影響的研究，不僅為柑橘指狀青霉的分子生物學研究奠定基礎(chǔ)，同時也為青霉屬其