豬同源基因Nectin-3的克隆、表達及初步生物信息學分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：克隆出豬同源基因nectin-3，并進行表達及初步的生物信息學分析，為進一步探討其生物學意義奠定基礎。
　　 方法：用人的nectin-3核苷酸序列在NCBI中Blast，將所得的豬的ESTs利用DNAstar軟件拼接，得到豬nectin-3的部分序列。參考所得序列及人相關ESTs設計引物，通過PCR，構建重組質粒、轉化入宿主菌、測序鑒定得到豬nectin-3的另一部分未知序列。取豬的多個組織行RT-PCR。利用Weste

2、rn Blot、細胞免疫組化檢測PED中的nectin-3分子。比較豬、人、小鼠nectin-3基因及氨基酸序列的同源性(http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw/)。預測豬nectin-3蛋白分子的三維結構(http：//www.cbs.dtu.dk/services/CPHmodels/)。
　　 結果：成功的克隆了豬同源基因nectin-3。RT-PCR顯示該基因在豬的多個組織和細胞中均有表達

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