精氨酸酶Ⅰ和誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、目的：從mRNA和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)精氨酸酶Ⅰ（Arginase-Ⅰ，Arg-Ⅰ）及誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthetase， iNOS）在肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表達(dá)情況，并探討二者的表達(dá)與 HCC臨床病理參數(shù)的關(guān)系及其在預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值。
　　方法：采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time PCR）技術(shù)，從mRNA水平上檢測(cè)68

2、例HCC、相應(yīng)癌旁肝組織及8例正常肝組織中Arg-Ⅰ的表達(dá)情況；采用蛋白免疫印跡（Western Blot）方法在蛋白質(zhì)水平上檢測(cè)了23例HCC、相應(yīng)癌旁肝組織中Arg-Ⅰ及iNOS蛋白表達(dá)情況；采用免疫組織化學(xué)染色（IHC）方法在蛋白質(zhì)水平上分別檢測(cè)了167例HCC、相應(yīng)癌旁肝組織中Arg-Ⅰ、iNOS的表達(dá)情況；分析Arg-1和iNOS蛋白與HCC的臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系及其在預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值；分析Arg-Ⅰ和iNOS蛋白表達(dá)的相關(guān)

3、性，探討Arg-Ⅰ及iNOS在HCC發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　結(jié)果：
　　1、Real-time PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)Arg-1 mRNA在68例HCC中的相對(duì)表達(dá)量為0.0997（0.213），明顯低于相應(yīng)癌旁肝組織0.563（0.459）及正常肝組織1（0），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　2、蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)亦證實(shí)了HCC中Arg-1及iNOS蛋白的平均表達(dá)水平明顯低于癌旁肝組織（P＜0.01）。
　　3、

4、免疫組化結(jié)果顯示Arg-1和iNOS蛋白主要在癌旁和正常肝組織中表達(dá)，在HCC中低或不表達(dá)。半定量積分法檢測(cè)Arg-1及iNOS在167例HCC中的蛋白表達(dá)免疫組化評(píng)分顯著低于相應(yīng)癌旁肝組織（P＜0.01）。在167例HCC中Arg-1的陽(yáng)性表達(dá)率為44.9％，iNOS的陽(yáng)性表達(dá)率為37.7%，二者表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.214，P=0.002）。隨著 HCC病理組織學(xué)分級(jí)的升高及分化程度的降低，Arg-1蛋白表達(dá)量逐漸減少（P＜0.01

5、），iNOS蛋白表達(dá)量亦逐漸減少（P＜0.01）。HCC組織中Arg-1蛋白的表達(dá)與術(shù)前甲胎蛋白（α-fetoprotein， AFP）水平、微血管侵犯、術(shù)后是否復(fù)發(fā)等指標(biāo)有關(guān)（P＜0.05）， iNOS蛋白的表達(dá)與微血管侵犯、包膜侵犯有關(guān)（P＜0.01），二者與HCC患者的性別、年齡、HBV感染、腫瘤數(shù)目、腫瘤直徑及是否合并肝硬化均無(wú)關(guān)（P＞0.05）；
　　4、生存分析顯示在HCC中Arg-1蛋白表達(dá)可以影響HCC患者術(shù)后無(wú)瘤

6、生存時(shí)間（P＜0.05），但并不影響HCC患者術(shù)后總生存時(shí)間（P＞0.05）。iNOS蛋白表達(dá)與HCC患者術(shù)后無(wú)瘤生存時(shí)間和總生存時(shí)間均無(wú)關(guān)（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、在HCC組織中Arg-1mRNA水平均明顯低于相應(yīng)癌旁肝組織和正常肝組織。
　　2、在HCC組織中Arg-1和iNOS蛋白表達(dá)水平明顯低于相應(yīng)癌旁肝組織。Arg-1與iNOS的表達(dá)呈明顯正相關(guān)，二者的表達(dá)缺失/下降與腫瘤低分化、侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)。