5-脂氧合酶與誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在大鼠脊髓缺血組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討5-脂氧合酶(5-LOX)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)在大鼠缺血脊髓組織中的表達(dá)特點(diǎn)及其相關(guān)性。 方法：50只雄性SD大鼠隨機(jī)分成5組，假手術(shù)組及缺血6h、12h、24h、48h組。采用阻斷左腎動(dòng)脈與髂總動(dòng)脈之間腹主動(dòng)脈發(fā)出的5條腰動(dòng)脈的方法建立大鼠脊髓缺血模型，運(yùn)用改良的Tarlov后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分、透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)和HE染色的方法對(duì)脊髓缺血模型進(jìn)行評(píng)價(jià)；免疫組化染色，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢

2、測(cè)大鼠脊髓組織中5-LOX和iNOS的表達(dá)。 結(jié)果：1.Tarlov后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分：假手術(shù)組10只大鼠均為5級(jí)，無一發(fā)生癱瘓；4個(gè)缺血組動(dòng)物都表現(xiàn)不同程度的癱瘓，其后肢功能評(píng)分較假手術(shù)組差異均有顯著意義(p<0.01)。2.透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)：假手術(shù)組核膜清晰，可見核仁明顯，常染色質(zhì)豐富且分布較均勻；缺血組出現(xiàn)線粒體腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)數(shù)目減少，染色質(zhì)邊集成塊。3.HE染色結(jié)果：假手術(shù)組神經(jīng)細(xì)胞外形清楚，結(jié)構(gòu)正常；缺血24，48

3、h組出現(xiàn)大量神經(jīng)元壞死，組織中有灶性出血，可見脊髓組織軟化。4.RT-PCR檢測(cè)：iNOSmRNA在假手術(shù)組脊髓組織低表達(dá)或不表達(dá)，缺血6h、12h、24h、48h脊髓組織5-LOX mRNA與iNOSmRNA的水平高于假手術(shù)組并呈遞增趨勢(shì)(F5-LOX=41.065、FiNOS=63.29，P<0.01)，5-LOX與iNOS在大鼠脊髓缺血組織mRNA水平表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.786、P<0.01)。5.免疫組化染色評(píng)分(H-scor

4、e法)：5-LOX在假手術(shù)組脊髓組織低表達(dá)，iNOS在假手術(shù)組脊髓組織組織低表達(dá)或不表達(dá)，5-LOX與iNOS在缺血6h、12h、24h、48h組表達(dá)高于假手術(shù)組并呈遞增趨勢(shì)(F5-LOX=239.14、FiNOS=240.31，P<0.01)，5-LOX與iNOS在大鼠脊髓缺血組織表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.948、P<0.01)。 結(jié)論：5-LOX和iNOS的參與了脊髓缺血繼發(fā)性的炎癥反應(yīng)，兩者在脊髓缺血性損傷發(fā)展過程中有協(xié)同作用