銀耳多糖提取純化、結(jié)構(gòu)特征及溶液性質(zhì)研究.pdf

1、以銀耳子實(shí)體為原料,采用熱水煮提、醇沉法提取銀耳粗多糖,經(jīng)酶-Sevage法去蛋白、DEAE-52纖維素離子交換層析和Sephacryl8-400凝膠過(guò)濾層析純化后得到銀耳均一多糖TFP1,用苯酚-硫酸法、間羥聯(lián)苯-硫酸法檢測(cè)其總糖、糖醛酸等組分的含量;PMP衍生化后反相高效液相色譜測(cè)單糖組成,結(jié)合紅外光譜和核磁共振圖譜分析銀耳多糖一級(jí)結(jié)構(gòu)特征;利用尺寸排阻色譜-激光光散射(SEC-LLS)、碘-碘化鉀實(shí)驗(yàn)、剛果紅實(shí)驗(yàn)、粘度檢測(cè)和原子力

2、顯微鏡技術(shù)對(duì)多糖溶液性質(zhì)進(jìn)行初步探討。
　　 組分分析表明精制銀耳多糖TFP1總糖含量為81.9％,糖醛酸含量為6.9％,不含蛋白質(zhì)和核酸;單糖組成分析、紅外光譜及核磁共振圖譜結(jié)果表明TFP1主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、木糖和巖藻糖四種單糖組成(含少量葡萄糖),其物質(zhì)的量比約為5.78:0.7:1.1:1,TFPl是分子構(gòu)型為α-型且含有O-乙?；Y(jié)構(gòu)的酸性雜多糖。
　　 SEC-LLS檢測(cè)計(jì)算出TFP1在NaCl溶液中的

3、重均分子量(Mw)為5.832×106Da,多分散系數(shù)(Mw/Mn)為1.005,均方根旋轉(zhuǎn)半徑(z1/2)為191.3 nm,說(shuō)明TFP1是分子量較大且糖鏈為剛性鏈的均一多糖。由Huggins方程和Kraemer方程計(jì)算的TFP1的特性粘度[η]=1508.3 mL/g,所以TFP1在25℃的0.1 mol/L,NaCl溶液中具有較高的剛性,分子鏈較為伸展。碘.碘化鉀實(shí)驗(yàn)中300-700 nm紫外-可見(jiàn)光吸收?qǐng)D譜中565 nm

4、處沒(méi)有最大吸收值,說(shuō)明TFP1是具有多分支或支鏈的大分子。隨著堿濃度升高,剛果紅與銀耳多糖形成的絡(luò)合物最大吸收波長(zhǎng)相應(yīng)減小,但相對(duì)于剛果紅本身最大吸收波長(zhǎng)減少明顯緩慢,說(shuō)明其沒(méi)有三螺旋結(jié)構(gòu)。由于自身帶電荷、分子內(nèi)作用力和多支鏈等原因在原子力顯微鏡下觀察到TFP1的形貌呈球狀。
　　 綜上,銀耳多糖TFP1是以甘露糖為主鏈,主要由四種單糖殘基(含少量葡萄糖)組成,含有O-乙?；Y(jié)構(gòu)且具有多個(gè)分支的酸性均一雜多糖,分子構(gòu)型為α-型。