白黎蘆醇(Resveratrol)對食管癌Ec109細胞生物學作用的初步研究.pdf

1、【背景及目的】
　　白藜蘆醇(Resveratrol,Res)化學名為3,5,4.-三羥基-1,2-二苯乙烯,是存在于葡萄皮、花生、紅酒中的一種植物多酚類物質(zhì),具有廣泛的生物活性和藥理活性。研究認為Res是一種重要的心血管保護因子,具有抗氧化,調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝,抑制低密度脂蛋白的氧化、減少花生四烯酸的產(chǎn)生、抑制血小板聚集等功能。最近的研究發(fā)現(xiàn)Res還是重要防癌因子,體外實驗研究已證實Res可通過干預細胞內(nèi)信號傳導、影響細胞周期蛋白的表

2、達等途徑而誘導多種腫瘤細胞的凋亡。本文旨在研究白藜蘆醇對人食管癌EC109細胞的生長抑制、凋亡誘導作用,并初步探討白藜蘆醇對食管癌細胞的作用機制,以期為臨床改善食管癌的治療現(xiàn)狀提供理論依據(jù)。
　　【材料和方法】
　　用不同濃度的白藜蘆醇處理人食管癌EC109細胞,通過MTT法檢測白藜蘆醇對EC109細胞生長的抑制作用;倒置相差顯微鏡和Hoechest33258熒光染色觀察 EC109細胞的形態(tài)學改變;DNA瓊脂糖凝膠電泳分析

3、細胞凋亡;透射電鏡觀察白藜蘆醇作用后細胞超微結構的改變;流式細胞術檢測白藜蘆醇作用后的細胞周期分布和細胞凋亡;Western Blot檢測白藜蘆醇作用后AnnexinⅠ蛋白表達量的變化情況。
　　【結果】
　　白藜蘆醇能夠抑制EC109細胞的生長增殖,并呈時間和劑量依賴性;500μmol/L Res作用48h后,倒置相差顯微鏡及熒光顯微鏡觀察均可見凋亡細胞的典型形態(tài)學變化;瓊脂糖凝膠電泳顯示500μmol/L Res處理組出

4、現(xiàn)明顯的DNA梯形帶;經(jīng)白藜蘆醇處理的EC109細胞可見細胞超微結構的改變:細胞表面絨毛突起減少,胞質(zhì)內(nèi)空泡化及染色質(zhì)邊集等凋亡形態(tài)的改變;白藜蘆醇能夠影響EC109細胞的細胞周期分布,使細胞周期阻滯于S期,G0/G1期細胞數(shù)量減少;125、250、500μmol/L Res處理組出現(xiàn)明顯的亞二倍體峰;Western Blot檢測顯示經(jīng)白藜蘆醇處理0、1、3、6、12、24、48h的EC109細胞,其AnnexinⅠ/β-actin光密

5、度積分值之比分別為0.1514、0.2019、1.2877、1.3263、1.8854、1.9585、2.0457,說明白藜蘆醇增強AnnexinⅠ蛋白的表達。
　　【結論】
　　白藜蘆醇能夠抑制EC109細胞的生長與增殖,其抑制作用呈劑量和時間依賴性。白藜蘆醇可以使EC109細胞周期阻滯于S期,抑制細胞DNA合成,并且這種作用呈劑量依賴性。白藜蘆醇可誘導EC109細胞發(fā)生凋亡改變。白藜蘆醇能夠上調(diào)EC109細胞Annexi